人B淋巴母细胞；HMy2.CIR厂家

公司产品采用干冰运输，经过逐步的降温，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暂时停止其生命活动，保存其活性，使您的实验更生动,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等国际品牌.

细胞名称 人B淋巴母细胞；HMy2.CIR

形态特性  淋巴母细胞

生长特性 悬浮生长

特征特性  ARH-77细胞株的快速生长突变株HMy.2 B用γ射线照射，选择HLA I型抗原表达缺失的细胞，得到HMy2.CIR细胞株。 这株细胞不表达HLA A位点和B位点的产物，但表达少量HLA Cw4。 这株细胞适于用作I型主要组织相容性抗原基因的转染宿主。 有报道称ARH-77细胞株呈EB核抗原阳性(EBNA+)和EB病毒荚膜抗原阳性(EBVCA+)。 由于Hmy2.CIR细胞株起源于ARH-77细胞株的快速生长突变株HMy.2 B，推测它也是EBNA+。  

培养条件  IMDM: Iscove＇s Modiefied Dulbecco＇s Medium  优质胎牛血清，10%

传代方法  1:2。3天内可长满。

传代情况 PN5

冻存条件  完全培养基+8%DMSO

细胞培养步骤：

一．人B淋巴母细胞；HMy2.CIR厂家培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基，使293T细胞悬浮生长。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

以下是公司正在热销的产品：

FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

骨形态发生蛋白4抗体 Anti-BMP4 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser364) 磷酸化转录因子E2F-1抗体 规格 0.1ml

X射线摄影暗匣5*7+增感屏 套

ZNF81 英文名称： 锌指蛋白81抗体 0.2ml

phospho-DAP Kinase 2 (Ser318) 英文名称： 磷酸化凋亡相关蛋白激酶2抗体 0.1ml

骨形态发生蛋白4抗体 Anti-BMP4 0.1ml
人B淋巴母细胞；HMy2.CIR厂家CCKBR 英文名称： 促胃泌素受体抗体 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PARC/CCL18(Human pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 人肺部活化调节趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉头蛋白4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/FITC FITC标记的小鼠抗人IgM 规格 0.1ml

C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白α 96T

SPOCK2 英文名称： 蛋白聚糖2抗体 0.2ml
操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。