一步式探针法qRT-PCR试剂盒客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
我们提供:
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
一步式探针法qRT-PCR试剂盒使用方法 :
1. 取新鲜抗凝血 5 mL,在 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方,用户需要根据所选产品的使用手册进行操作,这里不列出每种的详细步骤),也可以直接 2500 rpm 离心 5 分钟后取白细胞层到一新的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。
2. 在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为 2 mL。
3. 加 1 mL 的本产品,混匀后 55℃ 保温 3 小时,其间轻轻振摇数次。
4. 加入 3 mL 自备的 Tris 饱和酚,轻轻震摇 5 分钟,使得水相和酚相充分分开。
5. 3500 rpm 离心 15 分钟,上层水相含 DNA,中间白色层为蛋白质,下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含 DNA 的上清液转移到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。
7. 再用 Tris 饱和酚重复上面的抽提步骤,直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8. 在上清液中加入等体积的自备的氯仿,轻轻震摇 5 分钟,3500 rpm 离心 5分钟,转移上清液到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9. 在上清液中加入 0.1 倍体积的自备的 3 M 乙酸钠溶液(pH 5.2)和 2 倍体积的无水乙醇,轻柔颠倒混匀,将出现絮状的 DNA 沉淀。
10. 用移液枪头将 DNA 沉淀挑取出来,转移到 1.5 mL 的塑料离心管中,用 75%的乙醇浸泡 2 次。此操作可以去除 DNA 中残留的盐离子。
11. 转移 DNA 沉淀到一个 1.5 mL 的塑料离心管中,空气中放置 10 分钟左右待乙醇挥发后,加入 0.5 mL 自备的 TE 缓冲液溶解 DNA,4℃放置待用。公司产品仅用于科研
MMP-14(Matrix metalloproteinase-14)ZNF347半乳糖凝集素8抗体
GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1)ZBED5糖磷脂酰肌醇锚定蛋白137抗体
Ang- II (Angiotensin II )ZNF704胰高血糖素样肽2受体抗体
GLUT2(Glucose transporter type 2)ZNF434生长休止特定蛋白1抗体
ANP(atrial natriuretic peptide)ZCWCC1γ-谷氨酰转移酶轻链1抗体
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4)ZNF300γ1氨基丁酸受体α5/GABRα5抗体
GHRF (GHRH)ZBTB39G蛋白激活内向钾通道1抗体
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1)Zic1G蛋白激活内向钾通道3抗体
一步式探针法qRT-PCR试剂盒CITED1phospho-c-Jun(Ser243)人类白细胞抗原E(HLA-E)免疫试剂盒
Collagen IIC1orf86人类白细胞抗原B27(HLA-B27)免疫试剂盒
CSMD2C8ORF59人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)免疫试剂盒
CSMD3phospho-C5R1 (Ser338)人酪氨酰tRNA合成酶(YARS)免疫试剂盒
CSTP1Complement component C6人酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1(TDP1)免疫试剂盒
CTAGE6CEACAM7人酪氨酸羟化酶(TH)免疫试剂盒
CTAGE4Phospho-CEBP beta (Thr188)人酪氨酸激酶2(Tyk-2)免疫试剂盒
CLDND2Phospho-CEBP beta (Thr188 + Thr235)人酪氨酸蛋白激酶受体TYRO3(TYRO3)免疫试剂盒
一步式探针法qRT-PCR试剂盒注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的实验条件,先进的设备,高素质的实验人员,保证您片的实验得以良好的完成。我们承诺一对一的专门服务,您可以全称参与了解实验进程。