一步式染料法qRT-PCR试剂盒特点:
操作简单,整个过程只需要20 min左右。
灵敏度高,RT-PCR检测病毒的最终灵敏度可以达到 50拷贝/ml。
安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液,也不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
最多可以处理1.5 ml液体病毒样品(但需要加上离心富集病毒的步骤)。
与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
公司产品仅用于科研
一步式染料法qRT-PCR试剂盒使用方法
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
GastrinZBED3鸟苷酸还原酶2抗体
AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase)ZBTB38G蛋白偶联受体γ12抗体
GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)ZADH2生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白2抗体
AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1)ZBTB3G蛋白α亚单位蛋白Q抗体
MMP-1ZBBX生长抑制DNA损伤基因GADD45β抗体
MMP-2ZFP219细胞生长抑制蛋白22抗体(甲基化控制J蛋白)
MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor)ZFP36L1G蛋白偶联受体39抗体
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7)phospho-ZFP36L1(Ser334)桥尾蛋白抗体
一步式染料法qRT-PCR试剂盒CHRNA1CD44v10人类肌腱蛋白(TN)免疫试剂盒
CSFV Envelope glycoprotein E2CD44v4人类固醇细胞抗体(SCA)免疫试剂盒
CSDC2Claudin 4人类风湿因子(RF)抗体(IgM)免疫试剂盒
CA10C6orf140人类风湿因子(RF)抗体(IgG)免疫试剂盒
CD62LCACH2人类风湿因子(RF)抗体(IgA)免疫试剂盒
C-MycCACNA1G人类风湿因子(RF)免疫试剂盒
CCK8Claudin 3人类泛素蛋白ISG15 免疫试剂盒
E cadherinphospho-c-Jun (Ser73)人类白细胞抗原G(HLA-G)免疫试剂盒