片姜黄探针法PCR鉴定试剂盒PCR鉴定试剂盒使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
以下是PCR检测试剂盒的订购信息:
产品名称 | 英文名称 | 分类 |
片姜黄探针法PCR鉴定试剂盒PCR鉴定试剂盒 | Rhizoma wenyujin concisum | PCR鉴定试剂盒 |
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
片姜黄探针法PCR鉴定试剂盒PCR鉴定试剂盒其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
Anti-nuclear IGA AntibodyELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1)
Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A2ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4)
Pro-Nerve Growth FactorELISA Kit for Protocadherin 15 (PCDH15)
Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A2ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 3 (COL4a3)
TGF-P1ELISA Kit for Ferroportin (FPN)
tight junction protein 2ELISA Kit for Bone Marrow Stromal Cell Antigen 2 (BST2)
pro-brain natriuretic peptideELISA Kit for Isocitrate Dehydrogenase 1, Soluble (IDH1)
neuraminidaseELISA Kit for Dopamine Transporter (DAT)
EMPELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
Aminopeptidase NELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
片姜黄探针法PCR鉴定试剂盒PCR鉴定试剂盒茚满LTA (Human lymphotoxin Alpha,LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α
茚cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit 大鼠胞浆型磷脂酶A2
芘AFP-L3 ELISA Kit 小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3
菲LTB(Human lymphotoxin Beta) ELISA Kit 人淋巴毒素β
木聚糖OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit 兔骨保护素
非那西汀GnRH ELISA Kit 鱼类促性腺激素释放激素
苝VTG ELISA Kit 鲤鱼卵黄蛋白原
屈Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 小鼠CD3分子
蒽sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂酶A2
7,12-二甲基苯并[a]蒽IRF(Human interferon Regulatory Factor) ELISA Kit 人干扰素调节因子
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。