pP53-TA-luc哺乳报告质粒
基本信息
启动子: SV40
复制子: pUC ori,SV40 ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 哺乳细胞,信号通路报告载体
质粒大小: 5659bp
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
5'测序引物: 根据序列设计引物
3'测序引物: 根据序列设计引物
质粒简介
Pp53-TA-luc can be transfected into cells by conventional cell transfection method. The biyuntian firefly firefly firefly firefly luciferase reporter gene assay kit detection (RG005/RG006) or dual luciferase reporter gene assay kit (RG027/RG028).
Ultraviolet irradiation, ion irradiation can lead to the role of DNA damage or reagent can activate p53, can be used as a positive control pp53-TA-luc report gene detection.
![pP53-TA-luc1.png pP53-TA-luc1.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/c9f34457-31d7-4a51-b273-5609ce2bbe86.jpg)
质粒图谱![99.png 99.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/edae72b6-af29-4300-b85a-edf6f4bc01ae.jpg)
pP53-TA-luc哺乳报告质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pP53-TA-luc哺乳报告质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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