pUC57大肠克隆质粒
基本信息
别名: pUC-57
启动子: Lac/laco promoter
复制子: ColE1 ori
质粒分类: 大肠杆菌载体;克隆质粒
质粒大小: 2710bp
质粒标签: LacZ
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: 37℃,有氧,LB
5'测序引物: M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
3'测序引物: M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
备注: 蓝白斑筛选,单一的EcoRV酶切位点
质粒简介
pUC57是大肠杆菌克隆质粒,大小为2710bp,含有氨苄抗生素抗性基因,能在含有氨苄的LB培养基上生长,是一个高拷贝质粒载体,可用于蓝白斑筛选。
质粒图谱
![pUC57.png pUC57.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/f1713b0d-e7a2-466f-b689-4fd549fcf15e.jpg)
![pUC571.png pUC571.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/97b22eed-de0a-4848-8a1d-e0eb2c7ca31f.jpg)
pUC57大肠克隆质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pUC57大肠克隆质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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