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如何使用酶联免疫分析仪检测生物学

2023/08/31 15:30

阅读:80

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应用领域:
其他
发布时间:
2023/08/31
检测样品:
其他
检测项目:
蛋白质
浏览次数:
80
下载次数:
参考标准:
/

方案摘要:

如何使用酶联免疫分析仪检测生物学

产品配置单:

分析仪器

酶标仪

型号: YT-MB96A

产地: 山东

品牌: 云唐

¥1.65万

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食品安全检测仪多功能食品安全检测仪

型号: 食品安全检测仪YT-GX4000

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型号: YT-NY12CP

产地: 山东

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型号: YT-YA-A

产地: 山东

品牌: 云唐

¥1600

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方案详情:

如何使用酶联免疫分析仪检测生物学

酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子(通常是蛋白质)的方法,它基于抗原与抗体之间的特异性结合原理。ELISA可以用于医学、生物学研究、药物开发等领域,以下是使用ELISA检测生物分子的基本步骤:

材料准备:

试剂: 购买所需的ELISA试剂盒,其中包括涂板、标准样品、抗体、底物等。

设备: 酶联免疫分析仪、洗板机、微量移液器等。

样本: 准备待检测的生物样本,可以是血清、细胞上清、组织提取物等。

步骤:

涂覆: ELISA板的孔中涂覆需要检测的抗原或捕获抗体,使其附着在孔底。通常会将标准品(含已知浓度的抗原)也涂覆在其中,用于生成标准曲线。

阻断: 在涂覆后,加入一种阻断剂(如牛血清蛋白、BSA),以防止非特异性结合。

样本加入: 加入待测样本和已知浓度的标准品到不同的孔中。样本中的目标分子(抗原)会与捕获抗体结合。

孵育: 让样本在孔中孵育一段时间,使抗原与捕获抗体充分结合。

洗涤: 使用洗板机或手动方法洗去未结合的物质,以减少背景干扰。

检测抗体添加: 加入检测抗体,这个抗体通常与酶结合。这个检测抗体会特异性地与抗原结合。

二次孵育: 让检测抗体充分与样本中的抗原结合。

洗涤: 再次洗涤,去除未结合的物质。

底物加入: 加入一个底物,它会被酶催化产生染色或荧光信号。常用的底物有TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)或者荧光底物。

信号检测: 使用酶联免疫分析仪测量底物反应产生的信号。产生的信号强度与抗原在样本中的浓度呈正相关关系。

数据分析: 通过标准曲线,可以将样本中的信号强度转换为抗原浓度。

需要注意的是,ELISA的种类有很多,包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等,其具体步骤和注意事项可能会有所不同。因此,在进行ELISA实验前,最好详细阅读所使用试剂盒的说明书,并根据具体实验设计进行操作。

 


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