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昆山市赛特科学仪器有限公司

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莱克多巴胺的高效液相HPLC检测方案

2020/08/21 10:38

阅读：104

应用领域：

制药/生物制药

发布时间：

2020/08/21

检测样品：

化药制剂

检测项目：

含量测定

浏览次数：

104次

下载次数：

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参考标准：

SN/T 1924 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法

方案摘要：

莱克多巴胺是兴奋剂的一种，兴奋剂在英语中称“Dope”，是国际社会对禁用药物的一个习惯性统称，兴奋剂并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如β-阻断剂）。国际奥委会已经规定的属于兴奋剂的部分药品有：氯三苯乙烯、硝酸甘油、皮质类固醇、蛋白合成类固醇、诺龙、促红细胞生成素、睾丸素、支气管扩张剂、蛋白合成激素、苯乙酸诺龙等。使用兴奋剂，将对人的生理、心理产生极大的危害，使服用者心力衰竭、激动狂躁，成年女性男性化，男子过早秃顶，前列腺炎，前列腺肥大，患糖尿病，心脏病等，严重损害人的身心健康。

产品配置单：

分析仪器

美国原装进口安捷伦1100液相色谱仪

型号： 1100

产地：美国

品牌：安捷伦

¥5万 - 10万

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方案详情：

样品的制备

取试样5~10g至50mL聚丙烯离心管中,加入4g 无水硫酸钠(600 ℃烘2h)和10mL 乙酸乙酯-正丁醇混合液涡动提取15s ,超声提取10min,2500r/min离心5min ,用10mL乙酸乙酯-正丁醇混合液重复提取1次,合并乙酸乙酯-正丁醇层于50mL鸡心瓶中,加入异丙醇 5mL,在(70±5)℃下旋转蒸干。用0.04moL/L盐酸溶液3mL分3次溶解鸡心瓶中的残渣,转移至10mL离心管中(上层沉淀可用脱脂棉过滤除去),30000r/ min离心5min,取上清液过SLS小柱(依次用5mL水、5mL 甲醇、5mL 0.04moL/L 盐酸溶液预处理),保持流速为1mL/ min, 然后依次用5mL水、5mL甲醇淋洗小柱,真空抽干,用10mL4 %氨/甲醇溶液洗脱 ,收集洗脱液,在(50±5)℃下用氮气流吹干。用2%乙酸溶液定容到1mL,过0.45μm 微孔滤膜,供液相测定。

标准曲线的绘制

精密称取莱克多巴胺对照品25mg ,置100mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为莱克多巴胺储备液。精密量取莱克多巴胺储备液200uL，置10mL 容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,得莱克多巴胺工作液。分别准确吸取一定量的标准工作液,用流动相溶液稀释，定容,配制成浓度分别为2.5、5、10、15、25ng/ mL 的标准溶液，分别进行HPLC检测。

色谱条件

检测器：荧光检测。激发波长:226nm，发射波长:305nm,

色谱柱：C18 色谱柱(4. 6m ×250 mm ,5μm)

流动相：流动相为戊烷磺酸钠溶液[取800mL水,加20mL冰醋酸和0.87g戊烷磺酸钠(C5H11O3SNa·H2O)混匀]∶乙腈(78∶22,V/V)

流速：1. 0mL/ min

进样量：20μL

柱温：30℃