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荧光PCR冻干之聚合物

2020-08-02 10:22

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聚合物又称加聚物。由一种单体经聚合(加聚)反应而成的产物。分子具有重复的结构单位。包括晶态结构、非晶态结构、取向态结构以及织态结构。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明胶、聚乙烯亚胺等。聚合物常用作为蛋白质的冷冻保护剂,通常聚合物的稳定作用取决于聚合物的多重性质 , 如优先从蛋白质表面析出、 表面活性 、使蛋白质溶液私度升高从而阻止其他小分子(如 糖及 多轻基化合物 ) 的结晶 、 抑制冷冻过程中p H 值的剧烈变化等。 不同聚合度及浓度的聚合物所提供的保护作用不同 , 如聚合度大的 P v P 有着较高的玻璃化温度 , 随着 P v P浓度及分子量增加 , 水溶液的私度随之变大 , 例如蔗糖的玻璃化温度明显升高 , 对冷冻过程中的蛋白质所起的保护作用 随之也有所增加 ; 但聚合度过大时 , 聚合物会在冷冻过程中结晶 , 从而失去对蛋白质的保护作用 , 而且浓度及分子量过大时会增加最终产品的水分 , 使得制品中蛋白质变得更不稳定 。荧光PCR冻干时的几种保护剂使用范围:二硫苏糖醇的浓度为0.2-1mm,吐温20的浓度为0.2%-1%(v/v),海藻糖的浓度为0.2m以下,明胶的质量体积比为0.1%-1%(w/v),bsa的浓度为0.2-1mg/ml;
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为用户提供冻干工艺优化、保护剂配方研发、冻干一致性评价、冻干代工生产,制药、医疗、美容、大健康、材料行业冻干流水线开发、冻干工艺开发等定制化整体解决方案。 服务范围:冻干曲线摸索优化、冻干保护剂开发、冻干赋型剂开发、冻干生产放大、冻干一致性评价、GMP等级产品代工生产。化妆品冻干配方开发。制药、医疗、美容、大健康、材料行业冻干流水线开发、冻干工艺开发。擅长在蛋白及酶类抗体药物开发;分子、免疫、生化类等试剂、临床试剂冻干项目开发。冻干项目技术开发流程: 1.填写冻干开发需求书(可根据需要签订保密协议); 2.提供样品交给实验人员,实验人员将进行分析研究,确立技术方案; 3.我们根据开发工艺报价,双方签订《冻干技术开发合同》; 4.实验人员开始技术开发并及时向用户汇报开发进展; 5.实验人员将开发结果向用户汇报; 6.将开发成果寄给用户,并附有实验报告,用户进行验收。

在做孢子浆水溶液冻干时,先使用电子称称重方式,称取 8.0kg 纯化水,缓慢到入洁净的搅拌罐中,开启搅拌器;使用百分之一的 1kg 天平称取蔗糖粉末 800g 加入到搅拌罐中,搅拌混合均匀后待用。无高温灭菌设备,蔗糖溶液未进行灭菌。按要求将蔗糖溶液与孢子浆的体积比 2:1 加入,电子称称重孢子浆净重为4kg,全部加入搅拌罐。搅拌溶解后即为待冻干溶液。做冻干时选用Pilot10-15M冻干机,体积小,冻干效率好。建议制品上样高度为11mm,大约每盘的装量为2.5KG,包材使用不锈钢托盘即可。孢子浆水溶液冻干工艺:在-60℃的温度预冻大约5小时左右,在进行升华阶段干燥,温度大约从零下30℃上升至30℃,大约需要40多个小时。冻干结束后,样品方可出仓。冻干后,各盘样品均已干燥,使用洁净的金属铲进行刮取收样。

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