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上海联迈生物工程有限公司
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产品介绍
一步法sgRNA 合成试剂盒
| CRISPR/Cas9是一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，也是细菌和古细菌为应对噬菌体和外源质粒的攻击而演化来的一种获得性免疫防御机制。此系统的工作原理是通过人工优化的具有引导作用的sgRNA (Single Guide RNA)引导核酸酶Cas9蛋白在与sgRNA配对的靶位点处剪切双链DNA，引起DNA断裂，进而利用生物体内非同源末端修复机制或同源重组机制修复DNA，导致基因移码突变、替换或删除，致使基因功能丧失。 sgRNA的体外合成通常有两种策略：一种为构建含特异性序列的转录质粒，另一种则使用合成的oligo退火延伸生成含T7转录启动子的双链DNA分子，进而再使用T7 RNA聚合酶进行体外转录，从而获得sgRNA。利用合成的Oligo直接制备sgRNA，具有操作简单快速、可实现高通量等优势，已经成为体外合成sgRNA的首方案。Cas9的切割是通过向导RNA(gRNA)与靶DNA形成约20bp碱基的配对，且靶序列的3’端需要有PAM结构(NGG)，再引导Cas9作用实现的。本试剂盒可通过一步反应获得高纯度、高产量的sgRNA，仅需要合成一条含有特定靶标序列的Oligo，可最短在4h内获得30~50μg的sgRNA。 | |||
组份 | |||
| 名称10T50T2×sgRNA Reaction Mix100 μl500 μlsgRNA Enzyme Mix100 μl500 μl10×Anti sgRNA Oligo(5 μM)100 μl500 μlRNase Free DNase I20 μl100 μlRNase Free H2O1 ml1 ml | |||
原理 | |||
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储存 | |||
| -20℃可保存2年，避免反复冻融。 | |||
实例 | |||
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| Fig. 应用联迈生物 一步法sgRNA合成试剂盒获得的sgRNA，分别为37℃孵育30min、1h、2h、8h和过夜孵育的sgRNA，孵育时间越长，sgRNA产量越高。 | |||
一步法sgRNA 合成试剂盒信息由上海联迈生物工程有限公司为您提供，如您想了解更多关于一步法sgRNA 合成试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应一步法sgRNA 合成试剂盒外，上海联迈生物工程有限公司还可为您提供TAPA1蛋白；抗增生抗体靶分子1(TAPA1)重组蛋白、LYAR蛋白；Ly1抗体反应同源物(LYAR)重组蛋白、TAPA1试剂盒；人抗增生抗体靶分子1(TAPA1)ELISA试剂盒等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
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工商信息
企业名称
上海联迈生物工程有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310117003747946
成立日期
2017-09-26
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、一类医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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