柱式病毒RNAout 2.0
产品及特点
本产品是在基因柱式病毒 RNAOUT(CAT#:71001)的基础上开发 的、专门用于从血清(血浆)或其他液体样品中提取微量病毒 RNA 的升级产品, 它具有下列特点:
1. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右.
2. 不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
3. 灵敏度高,通过 RT-PCR 检测到的最终灵敏度低于 50 拷贝/mL,比柱式 病毒 RNAOUT 更高。
4. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。 5. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。
6. 与 RT-PCR 和荧光 RT-PCR 兼容。
7. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。 8. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清 液等无细胞材料。
规格及成分 成份 编号 大纸盒包装
RNA 病毒裂解液 LM3073 30 mL 柱式病毒 RNAout 溶液 B LM180602a 30 mL 离心吸附柱(窄口) 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL RNA 洗脱液 71207 10 mL 使用手册 71001sc 1 份
运输及保存 常温运输和保存,RNA 病毒裂解液长期(1 周)放置需放 4℃,有效期一年。
自备试剂 无
![QQ图片20191121152700.png QQ图片20191121152700.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/6fb646fa-010f-459f-8b5f-b352f7bf1a9f.jpg)
使用方法
1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.2 mL 液体病毒样品(如血清、血浆、脑脊液、 尿液、粪便、培养细胞上清液等)。如果病毒需要富集,可以将 1.5 mL 液体在 4℃下 24,000 g 冷冻离心 60 分钟,移弃 1.3 mL 后继续操作。
2. 加入 0.6 mL RNA 病毒裂解液,振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。注 意:RNA 病毒裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 加入 0.6mL 柱式病毒 RNAout 溶液 B,颠倒混匀。此时离心管中混合液 的总体积是 1.4mL。
4. 将 0.7mL 混合液将转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
5. 13000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
6. 再将剩余的 0.7mL 混合液将转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
7. 13000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
8. 加入 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,13000 g 室温离心 1 分钟,弃 收集管中穿透液。
9. 13000 g 室温离心半分钟。
10. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30 uL RNA 洗脱液,然后将离心吸附柱 套入一新的 1.5 mL 离心管中,室温放置 2 分钟。
11. 13000 g 室温离心 1 分钟,离心管中收集的样品即为 RNA 溶液。
12. RNA 样品可以直接用于 RT-PCR 或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。