PA317小鼠成纤维细胞
细胞英文(简称):PA317
细胞名称:PA317小鼠成纤维细胞
背景资料
源自TK- NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。 选择后,细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤。
细胞来源:ATCC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:胚胎
PA317小鼠成纤维细胞形态:贴壁;成纤维细胞样
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM (高糖)+10% FBS;37℃,5% CO2
传代方法:首次建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
动物细胞培养,大致的步骤是这样:
1.从动物胚胎或者一些刚出生的动物的器官或者组织上取得细胞,配制成细胞悬浮液.把细胞液放到培养瓶中,在培养箱里培养--------原代培养.
但是,不要以为这样就能一直无限培养下去.
因为PA317小鼠成纤维细胞在那个瓶壁上生长的时候,如果大量增殖,细胞之间会彼此相碰,细胞细胞就会停止分裂增殖,出现一种接触抑制.
2.我们为了它们能继续增殖,就用胰蛋白酶再把它们分开,然后再配制成细胞悬浮液,分开装到好几个瓶子里继续培养--------传代培养.
细胞株&细胞系
![](https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/fd5b14b6-ccee-4f84-a4c1-bb502651af5a.jpg)
1.它们都是传代培养里面的概念.都是10代以后的
2.细胞株是传代培养里10~50(不同物种不同组织细胞有差别吧)代,细胞系是50代以后的;
3.对于细胞繁殖而言,传到10代就很不容易了,所以细胞株是极少数的细胞
4.50代以后,细胞繁殖会出现另一个危机,基本上没有什么细胞能再传下去了.但是,有细胞发生了基因突变,像一个癌细胞一样无限地分裂下去,这就是细胞系.
PA317小鼠成纤维细胞错误辨识交叉污染图:
![](https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/6cf48cab-3b9d-458c-af93-204e2f7c82f2.jpg)
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