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二氧化碳培养箱无污染控制技术

2021-02-20 11:05

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资料摘要:

二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。 广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。 在生物活体内,生物体有自身的免疫系统保护细胞或组织,但是在体外培养时,没有任何保护自己的免疫屏障。对于二氧化碳培养箱的基本参数温度、CO2 和湿度,大多数培养箱都能满足研究实验的需要。然而,针对培养过程中面临的各种污染源,各品牌二氧培养箱的控制方式和效果不尽相同,因此细胞体外培养中*的威胁实际上是污染问题。 二氧化碳培养箱中的主要污染源:细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原体、非同种细胞。 对于细胞来说,理想的培养环境同样也适合这些污染物的生存,培养箱本身是不会辨别的,而细胞培养中大部分时间里细胞都是位于培养箱内,因此箱体内能否抑菌或灭菌关键! 细菌:细菌污染后,培养基1-2天就会变色,对细胞生长影响明显,应迅速将污染细胞与其它细胞系隔离,灭菌后丢弃,还要用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台。 病毒:由于病毒寄生生存,爆发后尽快和正常细胞隔离,丢弃处理,相对来说容易处理,对操作者威胁较大;尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。 真菌(霉菌和酵母菌):真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了;目前没有好的抑制方法,包括现在常用的两性霉素,一旦污染容易反复爆发,尤其孢子很难杀灭。
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1)时间:/ 2)样品:新鲜鲫鱼1条 3)仪器:主机,高通量组织研磨仪(由杭州聚同电子有限公司生产);配件,50ml不锈钢研磨罐1对; 4)步骤: a.在鲫鱼背部取2块鱼肉,每块5克左右(不含鱼鳞); b.用剪刀分别将2块鱼肉剪碎,分别放入2个研磨罐,同时每罐再放入2颗直径15mm研磨钢珠,然后分别旋紧研磨罐,将罐固定在研磨仪的摇臂中。 c.将TL2020高通量组织研磨仪研磨频率设为1800rpm,研磨时间设为3-4分钟,然后启动研磨仪。 d.研磨完全停止后,拿出研磨罐,旋开罐盖,取出研磨好的鱼肉样品。 高通量组织研磨仪研磨鱼肉组织的操作步骤与研磨效果演示: 1.从背部取取鱼肉,剪成两小块; 2.剪碎的鱼肉分别放入研磨罐内,每个研磨罐内放入2颗15mm研磨钢珠; 3.1800rpm条件下研磨3分钟; 4.研磨结果为很细的鱼肉泥; 5.结果: 研磨后的鱼肉成泥浆状,均匀细致,不含任何成块的鱼肉组织。说明用TL2020高通量组织研磨仪研磨鱼肉组织效果良好。 本文关键词:研磨鱼肉组织,组织研磨仪,高通量组织研磨仪

高通量组织研磨仪是实验室样品制备常用工具,它通过碳化钨小球或不锈钢小珠在样品管内来回震荡实现样本的粉碎、混合、均化以及细胞破碎等,可以对硬性、软性、弹性等样品进行快速的粉碎和均相化处理,符合理化分析实验室的要求,配置不同体积、不同材料的研磨罐,可以进行干磨、湿磨及冷冻研磨,也可以进行细胞破碎和DNA/RNA提取,在农业、生物医药、食品、质检、高校等各行各业都有广泛的应用。

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