天然产物的提取及纯化分离拥有广阔前景,
但使用常规的制备色谱进行操作的话,
往往会遇到许多问题
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成分难以提取、提取后的样品不纯、
色谱柱耗材成本高、溶剂消耗高、
待分离产物需要经过繁琐的预处理、
适用性单一、操作复杂等......
在上周刚刚结束的 2017 ISPMF
“医药与食品中的植物化学物质”国际会议上
▲ 上图为ISPMF会议现场,来自Gilson的中国区应用经理孙其昌博士
为大家发表演讲议题《离心分配色谱-质谱联用:一种可从天然提取物中高效灵活地纯化目标化合物的技术。》
Gilson为大家带来了一款
能完美解决前述问题的
「高效利器」
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CPC 离心分配色谱系统
▲ CPC离心分配色谱系统(左)和PLC 纯化色谱系统(右)
什么是离心分配色谱(CPC)?
离心分配色谱技术的英文全称是Centrifugal Partition Chromatography, 由Nunogaki发明,简称CPC。CPC属于现代逆流色谱技术的一种,它和滴流逆流色谱(DCCC)、旋转腔式逆流色谱(RLCCC)以及回旋腔室逆流色谱(GLCCC)等同属于非螺旋管式的逆流色谱。
离心分配色谱技术的原理
离心分配色谱(CPC)技术采用特殊的旋转式不锈钢柱,其固定相和流动相均为液体。CPC柱的末端带有旋转密封器,使得溶剂进入转子。旋转柱本体由带有数千个相连分离腔的不锈钢碟片堆叠。这个特殊的设计保证了固定相溶剂在离心力下保留,而流动相溶剂则可以流过并完成萃取。
和以硅胶颗粒等材质作为固定相以及有机溶剂作为流动相的传统HPLC色谱有所不同,离心分配色谱技术的原理和液液萃取相似。两者都是利用待分离物质在两种互不相溶的有机溶剂中不同的溶解度作为基础,将其中一种溶剂作为固定相,另外一种作为流动相。
离心分配色谱的技术优点
细数离心分配色谱(CPC) 十大优势:
1. 无需硅胶色谱柱的双相溶剂系统
2. 无需更换色谱柱或者循环处理硅胶填料
3. 节约五倍的溶剂消耗
4. 可达100%的回收率:消除不可逆的样品吸收性和变性
5. 方法放大简单(mg至kg级)
6. 灵活适用各类应用,如复杂的天然萃取物和蛋白质分离及合成混合物分离
7. 进样量大
8. 无需进行样品预处理即可进样
9. 不会导致脆弱分子的变性
10. 无常规色谱柱污染和堵塞的风险
离心分配色谱vs.传统制备色谱
离心分配色谱技术和利用色谱柱的制备色谱相比,其使用成本更低。最大的优点就是为用户节省了色谱柱这个耗材,CPC利用的是不锈钢旋转式分离柱,不需要频繁的更换。CPC技术在对有机溶剂的消耗量上也更为节省,在分离过程中不需要使用大量的流动相来冲洗色谱柱。而分离度高,可以针对特定物质进行高纯度分离也是CPC技术的优点之一。
离心分配色谱仪中所采用的不锈钢旋转分离柱能适应不同的分离应用需求,一般分离过程中所消耗的溶剂为HPLC的五到十分之一,也不会产生固体废物。
由于不使用硅胶颗粒这类较为脆弱的分离介质,当科学家采用离心分配色谱仪进行目标物的制备纯化时,待分离的产物无需经过前处理就可以直接进样。
CPC技术可以兼容多肽和蛋白质的分离,没有样品损失,坚实耐用,可以直接从实验方法向工业分离进化。
离心分配色谱技术广泛应用前景
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