一种活细胞倒置荧光显微镜温度校准方法的介绍

《一种活细胞倒置荧光显微镜温度校准方法的介绍》

    活细胞培养荧光显微镜由于可以进行活细胞常规培养条件，例如：温度控制，湿度控制，CO2浓度控制，O2浓度控制，同时配置高速摄像头可以进行时间序列（Time-Lapse）,结合多色荧光滤片切换，LED单波长光源激发，可配备相差(Phase Contrast)，微分干涉（DIC），荧光等对照方式可以更加直观详细的进行细胞形态记录而受到广大科研用户的认可。近年来，倒置荧光显微镜配置活细胞培养装置的相关实验越来越普遍，目前市面上集成的荧光成像系统很多，例如：GE公司的DELTAVISION活细胞成像系统，ZEISS公司的CELL OBSERVER系统，或其它大品牌公司的整套活细胞成像系统，价格昂贵（20万美元以上），维护成本高，厂家工程师上门速度通常比较慢或者收费贵，常规实验室难以负担。目前各实验室通常都配备有倒置荧光显微镜，活细胞培养装置是模块化设计的产品，广州科适特科学仪器有限公司提供一种优惠简便的解决方案，定制整套活细胞或对现有的荧光显微镜进行活细胞升级，购置成本低，拆装方便，兼容目前市场主流的各大显微镜平台，例如：徕卡，尼康，奥林巴斯，蔡司等都可以提供定制的适配器。

     活细胞培养装置中温度控制是一个重要的实验参数，但是由于活细胞培养的探测器通常位于培养腔室的上壁边缘，由于室温（例如22℃）与培养箱中设定温度（例如37℃）偏差比较大，温度传导散热效应，显微镜细胞培养箱培养皿中细胞真实的温度难以达到设定温度，为了保证真实培养温度精确，显微镜活细胞培养在不同的实验室环境首次使用前通常需要进行校准（Calibration）。

     最近刚好广州科适特科学仪器有限公司装机的客户有跟我们问到温度校准的问题，顺便以我们公司代理的IBIDI活细胞培养装置为例简单介绍一下活细胞培养装置温度校准的问题。广州科适特科学仪器有限公司是德国IBIDI活细胞培养产品的国内授权代理，价格优惠，发货速度快。下面以广州科适特定制的活细胞荧光显微镜为例，简单介绍一下如何做活细胞培养装置的温度校准。

一．显微镜活细胞装置的组成通常包含活细胞培养腔体，控制模块单元，加湿柱，连接导管，CO2气瓶，压缩空气瓶等配件。

二、培养箱腔体由上盖（LID）和加热底板（PLATE）组成，通过适配器固定在倒置显微镜的载物台上，内部有温度探头，气体输入输出接口，控制面板可以设置气体的流速，CO2及O2浓度等参数。

三．取出校准专用小工具，校准用温度探头，即一条可插入培养皿内部的线缆。上盖有开孔的校准培养皿。将探头插入校准培养皿的小孔，用此探头监测实时培养皿内部的温度。目的是将内部温度设置为活细胞目标温度（例如:37℃）。

四．打开温度控制器电源开关，在控制器的前端LED面板上会显示相关的参数。控制器最多可以控制4个通道的温度设置，活细胞培养装置上盖和底板是可以加热的，通常只需要占用前面两个通道，I指示的内部探头的温度，S指示的设定温度，E指示的是外部探头的温度。例如我们希望活细胞培养皿内的温度为37℃，则我们可以通过调节上盖（通道1）和低加热板（通道2）的设定温度，当E指示的外部探头温度达到37℃，并能持续15分钟保持不变。则校准工作完成。

五．校准工作完成后，记录下上盖（LID）和下加热板（PLATE）的设定温度。每次开始实验工作时，只需要将设定温度保持在我们已经校准好的温度，则可以认为培养皿内部实验环境的温度可以保持在目标温度，例如37℃。此过程类似于在开展活细胞培养实验之前进行的预实验。

六．倒置荧光显微镜活细胞培养模块化设计，此设备可以兼容各大显微镜品牌，如果实验室有多台不同品牌倒置显微镜，只需要一台即可随用随装，方便实用。如果有问题可以咨询广州科适特科学仪器有限公司的服务工程师。