Detroit 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞

细胞名称：Detroit 562    人咽头癌胸水转移细胞

组织来源：器官：咽头；疾病：癌；取材转移灶：胸水

培养条件：MEM +10% FBS

形       态：贴壁；上皮细胞样

背       景：角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

DETROIT 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：DETROIT 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了DETROIT 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对DETROIT 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

DETROIT 562细胞;人咽头癌胸水转移细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

0423GSN0.2％的明胶溶液0.2% Gelatin Solution100ml

0500FBS胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested500 ml

0503P/S青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution5 ml

0513P/S青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution100 ml

0523AMS抗真菌溶液 Antimycotic Solution50 ml

0533ABAMS抗菌/抗霉菌溶液Antibiotic/Antimycotic Solution50 ml

0543PURO-10嘌呤霉素Puromycin , 10 mg/ml10 x 1 ml

0553PURO-1嘌呤霉素Puromycin, 10 mg/ml1 ml

0563MIS支原体抑制剂Mycoplasma Inhibitor Solution, 10 mg/ml10 x 1 ml

0600CCGW细胞培养超纯水 Cell Culture Grade Water500 ml

0603MDS  肌细胞分离液Myocyte Detachment Solution100 ml 

0703BPE牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract25 mg

0713BPE牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract100 mg

0733LALG丙氨酰谷氨酰胺L-alanyl-l-glutamine (200mM)100 ml

0803ITS胰岛素铁硒传递蛋白Insulin-Transferrin-Selenium, 100x10 ml

0813L-Glu左旋谷氨酰胺溶液 L-Glutamine Solution, 200 mM100 ml