![QQ截图20161128101052.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201611/uepic/10ab9185-ba19-41c6-a8a8-210bad35e0f1.jpg)
细胞名称:NCI-H295R 人肾上腺皮质腺癌细胞
培养条件:DMEM:F12+0.00625mg/mL insulin+0.00625mg/mL transferrin+6.25ng/mL selenium+1.25mg/mL bovine serum albumin+0.00535mg/mL linoleic acid+2.5% Nu-Serum I
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:该细胞系源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞,群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长,而NCI-H295R呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄激素的能力,对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。
NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞传代后不贴壁了,成团浮在培养基里,怎么办?细胞,落层生长后,消化传代,可能细胞密度大,吹打的时候有一些细胞还是成团的,可是大部分已经成单个的了,24小时后观察,细胞都成团了,不贴壁,应该没有污染。现在怎么办?重新吹打能散开吗?
技术回答:NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞密度过大细胞老化了,消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好,建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看,不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除,然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养,具体根据最后分散细胞的数量来哦~
重新吹打了NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞,还是有很多贴壁的细胞,可是还是有好多细胞碎片浮着,换了液还是有好多浮着。另外,培养瓶老是弄不均匀,就瓶子的四边都很密集,其他就很均匀,不知道会不会影响细胞状态?
技术回答:密集的地方容易老化,对NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~
细胞处理:细胞如果裂解后,RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解,可以考虑:1.加T-Zol裂解液,-80度保存;2.分选后按细胞冻存步骤冻存,存于-80度,应该能放3-6个月。
NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞培养:图片聚焦没聚准,聚团现象不是很严重,状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高,可以考虑换好点的血清看看。
小鼠卵巢颗粒细胞1原代9-5/5-5ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16030901-滑膜1原代9-5/2-3ADMEM/F12+10%FBS
人胆管上皮细胞1原代9-3/2-3A上皮培养基+2%FBS
小鼠真皮成纤维细胞1原代9-4/5-5ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16032901-成骨细胞1原代9-3/2-4ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16031601-韧带1原代9-3/2-5ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16032901-滑膜2原代9-3/3-1,3-2ADMEM/F12+10%FBS
小鼠心肌成纤维细胞2原代9-3/3-3,3-4ADMEM/F12+10%FBS
人韧带2原代9-3/3-5,4-1ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16032901-滑膜2原代9-3/4-2,4-3ADMEM/F12+10%FBS
小鼠肾小管上皮细胞1原代9-3/4-4A上皮培养基+2%FBS
小鼠肾系膜(成纤维)1原代9-3/4-5ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16032901-滑膜3原代9-3/5-2,5-3,5-4ADMEM/F12+10%FBS
人韧带1原代9-3/5-5ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16031601-韧带3原代9-2/1-1,1-2,1-3ADMEM/F12+10%FBS
IPS P162原代12-4/1-3,1-4APSCeasy完全培养基
IPS P172原代12-4/1-5,2-1APSCeasy完全培养基
IPS P171原代12-4/2-2APSCeasy完全培养基
Hum-16030201-间充质干细胞1原代10-1/2-5ADMEM(低糖)+10%FBS
Hum-16032902-间充质干细胞3原代10-1/2-2,2-3,2-4ADMEM(低糖)+10%FBS
Hum-16031601-韧带细胞1原代10-1/2-1ADMEM/F12+10%FBS
小鼠心肌成纤维细胞2原代10-1/1-4,1-5ADMEM/F12+10%FBS
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