NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞

细胞名称：NCI-H295R    人肾上腺皮质腺癌细胞

培养条件：DMEM:F12+0.00625mg/mL insulin+0.00625mg/mL transferrin+6.25ng/mL selenium+1.25mg/mL bovine serum albumin+0.00535mg/mL linoleic acid+2.5% Nu-Serum I

形　　态：贴壁；上皮细胞样

背　　景：该细胞系源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295，后者由Gazdar AF等建立，从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞，群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长，而NCI-H295R呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄激素的能力，对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。 

NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

NCI-H295R细胞;人肾上腺皮质腺癌细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

小鼠卵巢颗粒细胞1原代9-5/5-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030901-滑膜1原代9-5/2-3ADMEM/F12+10%FBS

人胆管上皮细胞1原代9-3/2-3A上皮培养基+2%FBS

小鼠真皮成纤维细胞1原代9-4/5-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16032901-成骨细胞1原代9-3/2-4ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16031601-韧带1原代9-3/2-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16032901-滑膜2原代9-3/3-1，3-2ADMEM/F12+10%FBS

小鼠心肌成纤维细胞2原代9-3/3-3，3-4ADMEM/F12+10%FBS

人韧带2原代9-3/3-5，4-1ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16032901-滑膜2原代9-3/4-2，4-3ADMEM/F12+10%FBS

小鼠肾小管上皮细胞1原代9-3/4-4A上皮培养基+2%FBS

小鼠肾系膜（成纤维）1原代9-3/4-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16032901-滑膜3原代9-3/5-2，5-3，5-4ADMEM/F12+10%FBS

人韧带1原代9-3/5-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16031601-韧带3原代9-2/1-1，1-2，1-3ADMEM/F12+10%FBS

IPS P162原代12-4/1-3,1-4APSCeasy完全培养基

IPS P172原代12-4/1-5，2-1APSCeasy完全培养基

IPS P171原代12-4/2-2APSCeasy完全培养基

Hum-16030201-间充质干细胞1原代10-1/2-5ADMEM（低糖）+10%FBS

Hum-16032902-间充质干细胞3原代10-1/2-2，2-3，2-4ADMEM（低糖）+10%FBS

Hum-16031601-韧带细胞1原代10-1/2-1ADMEM/F12+10%FBS

小鼠心肌成纤维细胞2原代10-1/1-4，1-5ADMEM/F12+10%FBS