ELISA试剂盒血清标本应趁新鲜使用
ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检查。
如有细菌污染,菌体中也许富含内源性HRP,也会发作假阳性反应。
如在冰箱中保留过久,其间的可发作聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
ELISA的操作因固相载体的构成不一样而有所区别,国内医学查验一般均用板式点。
血浆中除尚富含纤维蛋白原和抗凝剂外,别的成份均平等于血清。
制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清天然凝结、收缩后即可获得。
除特殊情况外,在医学查验中均以血清作为检查标本。在ELISA中血浆和血清可平等使用。
血清标本可按惯例办法收集,应留意防止溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本也许会增加非特异性显色。
ELISA试剂盒在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一星期测定的需低温冰存。
冻住血清融解后,蛋白质有些浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,防止气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振动。
混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检查。自配的缓冲液使用pH计丈量较正。
重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保留作多次检查,宜少数分装冰存。
保留血清自收集时就应留意无菌操作,也可加入恰当防腐剂。
按试剂盒说明书的请求预备实验中需用的试剂。
ELISA顶用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。
有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如大便和某些分泌物)。
大多数ELISA检查均以血清为标本。从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后使用。
ELISA试剂盒中本次实验不需用的有些应及时放回冰箱保留。
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