GENECLEAN R Turbo Kit 玻璃奶(Glassmilk)法凝胶回收试剂盒
快速回收和浓缩DNA片段,能有效的去除盐、蛋白质、反应体系中的限制性内切酶或修饰酶
高结合力:柱结合10ug,常规为5ug左右
高效回收率:大于95%,常规试剂盒60-90%不等。玻璃奶膜覆盖于过滤外层,不会造成微粒的流失,保证了回收率,大大高于其他方法。玻璃奶在高盐和低ph溶液时会优先结合核苷酸,反之可以使核苷酸很快地与玻璃奶分离至低盐溶液或者水中,保证了高的回收率。
片段范围广:100bp-300kb,常规100bp-50kb,回收的片段更为完整,能进行大片段DNA的回收,减少片段的断裂。而常规胶回收微粒松散,容易造成多个微粒对大片段的同时吸附造成断裂。
去处杂质强:从凝胶或溶液中快速回收和浓缩DNA片段,能有效的去除:琼脂糖、磷酸酶BAP/CIP/SAP、限制性内切酶、逆转录酶、Tag聚合酶、末端转移酶、PCR引物/接头、残留的有机溶剂、盐和缓冲液成分、溴化乙锭、激酶、T4连接酶、DNA酶等
快速:15分钟内可完整12个样品的回收,不再需要反复的冲洗,再也不需要乙醇反复过柱
有效:纯化后的样本下游应用效果良好,可用于:测序,克隆,PCR,转化,显微注射,微阵列分析,转染等。
操作步骤
样本准备:含有所需DNA片段凝胶切割或PCR反应液体积测定
加入Geneclean trubo 钠盐溶液,加入比例:
胶回收 Geneclean trubo钠盐溶液:凝胶= 100ul:100mg ,55℃孵育5分钟
PCR反应液 样本体积的5倍
取上一步准备好的DNA溶液,加入滤芯,室温14000rpm离心5sec后,清空收集管。控制每次滤芯内溶液不多于600ul,如大于600ul,分几次加入并离心。
加入500ul清洗液,室温14000rpm离心5sec,清空收集管。
室温14000rpm离心4min。
使用1ml的吸头在#1的位置小心加入样本液
使用注射器或泵(带有2英寸长,18号或更小钝角针头)在#2的位置真空抽出收集管中的液体。
取用一个新的收集管,准备洗脱。加入30ul洗脱液室温孵育5min,室温14000rpm离心1min,收集管内即为所需的DNA溶液,可用于测序,克隆,PCR,转染等操作。
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