Taq DNA Polymerase

PC1100-500 Taq DNA Polymerase Taq DNA Polymerase 国产 500U 支

Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T)

复性温度=Tm值－(5～10℃)

在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60秒，足以使引物与模板之间完全结合。

3、Taq DNA Polymerase延伸温度与时间：PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增段的长度而定，一般1Kb以内的DNA段，延伸时间1min是足够的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。

4、循环次数：循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40T之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。

产品内容：

Taq DNA Polymerase酶储存缓冲液 10×Taq Buffer(含Mg2+)

20 mM Tris-HCl (pH 8.0) 200 mM Tris-HCl (pH 8.4)

0.1 mM EDTA 200 mM KCl

1 mM DTT 15 mM MgCl2

100 mM KCl 1%Triton X-100

50% glycerol 其它

Stabilizers

活性定义：1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制检测：SDS-PAGE检测Taq DNA Polymerase纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

Taq DNA Polymerase注意事项：

1、Taq DNA Ploymerase应储存于-20℃，有效期12个月。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。

3、10×Taq Buffer分为含15 mM Mg2+和不含Mg2+两种，不含M g2+的Buffer，另外配有25 mM MgCl2。如果没有特别指定，通常提供的为含有15 mM Mg2+产品简介：本公司生产的Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermus 的Buffer。aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为94 KD。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性，无3’→5’核酸外切酶活性。在PCR反应中，该酶的延伸速度为1-2kb/分钟，PCR产物3’端带A，可直接用于T/A载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组DNA污染，稳定性好，特异性强，一般用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等