2017-01-11 20:03
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USP-List (Dr. Maisch HPLC-Phases) Code Spezification Dr. Maisch Phases USP-L1 Octadecyl silane /C18, RP18, ODS) b chemically bonded to porous or ceramic silica microparticles, 1.8 untill 10μm Reprosil 100 C18 ( XBD) Reprosil-Pur C18-AQ Reprosil-Pur ODS-3 Reprosil Gold C18 Reprosil Saphir C18 Reprosil 80 ODS-2 Reprosil-Pur Basic C18 (HD) Reprospher C18 (DE) Equisil ODS Equisil BDS C18 Reprobond C18 Repropack C18 ReproShell C18 (Coreshell) Ultrasep ES RP18
西洋参中人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 分析报告 上海宸乔生物科技应用及技术服务部 色谱条件 色谱柱:Enusil® BP C18(L);5 µm,150 Å,4.6 ×250 mm; 流动相 A:0.1%磷酸水溶液; 流动相 B:乙腈; 检测波长:203 nm; 流速:1.0 mL/min; 柱温:40℃; 进样量:10 μL。 洗脱梯度: 时间(min) A% B% 0 81 19 25 80 20 60 60 40 90 45 55 100 40 60 105 81 19 120 81 19
在用离子交换柱分离蛋白时,流动相的pH值对保留值影响很大,当选用阴离子型蛋白分析柱时,如#####若流动相的pH值小于蛋白的pI值时,蛋白分子阳离子状态,则在柱上没有保留,只有当流动相的pH值大于蛋白的pI值时,蛋白分子呈阴离子,才能在阴离子交换柱上得到保留。另外,当流动相或样品中的离子强度过大时,也会造成蛋白在离子交换柱上不保留。
根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。如果实验目的是将样品中的大分子物质和小分子物质分开,由于它们在分配系数上有显著差异,这种分离又称组别分离,一般可选用Sephadex G-25和G-50,对于小肽和低分子量的物质(1000-5000)的脱盐可使用Sephadex G-10,G-15及Bio-Gel-p-2或4。如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物质进行分离,这种分离又叫分级分离。一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶,层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部,由于Kd不同,最后得到分离。 根据经验,组别分离时,大多采用2-30cm长的层析柱,分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,其直径在1-5cm范围内,小于1cm产生管壁效应,大于5cm则稀释现象严重。长度L与直径D的比值L/D一般宜在7-10之间,但对移动慢的物质宜在30-40之间。