小鼠尿微量白蛋白酶联免疫分析
小鼠ELISA试剂盒实验原理:
本ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠尿微量蛋白(ALB)水平。用纯化的小鼠尿微量蛋白(ALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(ALB),再与HRP标记的ALB抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠尿微量蛋白(ALB)浓度。
注意事项:
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于尺度品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。本试剂不同批号组分不得混用。各步加样均应使用加样器,并常常校对其正确性,以避免试验误差。ELISA试剂盒从冷藏环境中掏出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保留。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。严格按照仿单的操纵进行,试验结果判断必需以酶标仪读数为准,所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。请每次测定的同时做尺度曲线,最好做复孔。底物请避光保留。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数目多,推荐使用排枪加样。如与英文仿单有异,以英文仿单为准。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
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