您好,欢迎访问仪器信息网
注册
上海研域仪器设备有限公司

关注

已关注

已认证

粉丝量 0

当前位置: SHYY > 资料中心 > 大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响

大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响

2015-05-18 16:25

浏览:42

分享:

资料摘要:

大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响 血清是一种成分复杂的混合物,不同批次血清对细胞生长的促进作用不同。大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴度的影响表现在以下几个方面: 1、细胞生长速度缓慢,长满单层时间长;从同一细胞瓶中分出两瓶细胞,用同一种培养液,分别加入10%的对照血清和待检血清,在相同条件下培养72小时,会出现对照血清长满单层,而待检血清大约只有60~70%,这种血清就不适合用来大规模培养细胞。 2、细胞传代后形态不正常,细胞状态发生变化;由于血清的质量问题,使原本状态正常的细胞经传代后形态会变差;比如:细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点(并非污染),或者细胞表面形成一层油状覆盖物;细胞的轮廓变得模糊,细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒填充,从而影响细胞向四周扩展生长。 3、细胞传几代后就出现脱壁现象,不能连续传代;质量较差的血清缺乏某种细胞的贴壁因子,会使细胞在传代过程中逐渐丧失贴壁的能力。细胞会从正常的贴壁状态,边缘开始萎缩,上翘。观察到的现象就是细胞表面不光滑,晃动细胞瓶会看到细胞表面有絮状物随培养液波动。随着传代次数增加,细胞萎缩的情况越来越严重,直到最终完全脱壁而死亡。 4、细胞长的很好,致密的单层,状态也很正常,但是接毒后细胞基本不发生病变,做滴度检测几乎测不出抗原滴度。这种情况也许是因为血清中含有与接种的病毒有同源的特异性抗体。比如血清中经常会存在乙脑抗体,牛腹泻病毒抗体等,如果存在这些抗体,就会把接进去的病毒给中和掉。如果抗体滴度很高,病毒会被抗体完全中和,就没有病毒颗粒在细胞中增殖,所以会检测不到病毒滴度。这种情况给疫苗企业造成的损失是相当大的,不产毒等于前面所做的那么多工作全部白费,浪费人力、物力,尤其是时间上的浪费,从培养细胞开始到接病毒,到收液至少需要一两个月,一旦出现不产毒的情况,那么这一两月时间就白白浪费掉了,这也是牛血清给疫苗企业造成的风险之一。 5、细胞生长的状态一般,产毒少,毒价低。这种情况比较常见,细胞是病毒的载体,由于血清质量不好,导致细胞生长状态不好,病毒就无法进行正常的复制。并非所有病毒都不能复制,所以就造成疫苗的效价不够,可能造成不合格产品。

下载本篇资料:

资料文件名:
资料大小
下载
新建 Microsoft Word 文档 2 .doc
10KB

相关资料

人抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 96T 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清样本中抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)表达。 实验原理 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)的存在与否。 注意事项 1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。 2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物请避光保存。 6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm 7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 20pg/ml-480pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中血清淀粉样蛋白A(SAA)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)水平。用纯化的小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清淀粉样蛋白A(SAA),再与HRP标记的血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血清淀粉样蛋白A(SAA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)浓度。 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

SD大鼠NaKATP酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 5 U/L -160 U/L 使用目的: 本试剂盒用于测定SD大鼠血清、血浆及相关液体样本中NaKATP含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中SD大鼠NaKATP水平。用纯化的SD大鼠NaKATP抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入NaKATP,再与HRP标记的NaKATP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的NaKATP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中SD大鼠NaKATP浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

鸡肌钙蛋白T(Tn-T)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 12ng/L - 500ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中肌钙蛋白T(Tn-T)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡肌钙蛋白T(Tn-T)水平。用纯化的鸡肌钙蛋白T(Tn-T)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌钙蛋白T(Tn-T),再与HRP标记的肌钙蛋白T(Tn-T)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌钙蛋白T(Tn-T)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡肌钙蛋白T(Tn-T)浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

上海研域仪器设备有限公司

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
提交留言
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位
联系方式:

公司名称: 上海研域仪器设备有限公司

公司地址: 上海市闵行区闵北路88弄1-17号、18-30号第13幢038室 联系人: 马维远 邮编: 201107

主营产品:

仪器信息网APP

展位手机站