玉米中呕吐毒素含量快速定量检测方案

呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，属单端孢霉烯族化合物。由于它可以引起猪的呕吐而得名，呕吐毒素DON的含量超过1mg/kg时就会对人及牲畜的健康产生损害，欧盟分类标准为三级致癌物。

我国国标GB2761-2011中规定了谷物及谷物制品中(包括玉米、玉米面、大麦、小麦、麦片和小麦粉)呕吐毒素DON的限量标准为1000 μg/kg。

方案介绍：玉米中呕吐毒素含量快速定量检测方案选用CSY-YG701呕吐毒素荧光定量检测仪（深圳市芬析仪器制造有限公司）、电子天平、离心机、粉粹机 、涡旋振荡器检测设备，该方法操作简单，结果准确，整体测试时间20分钟左右。

一、实验所需器皿准备

1、CSY-YG701呕吐毒素荧光定量检测仪（深圳市芬析仪器制造有限公司）

2、电子天平（国产）

3、离心机（国产）

3、粉粹机  （国产）

4、涡旋振荡器（国产）

5、可调移液器1000-5000ul 可调移液器 20-200ul（国产）

二、样品前处理

1、准确称取2.0g粉碎均匀的谷物样本，放入50ml离心管或者锥形瓶中，加入10ml样品提取液，用旋涡振荡器震荡3分钟混匀，混匀后即为样品液。

2、混匀后，取1.5ml均匀的样品液在离心管，并在3500转以上离心5分钟。

3、取离心液上清液100ul+300ul样品提取液震荡5秒混匀即为待测液。

三、样品检测

1、开始检测：取60ul待测液+60ul荧光标记物,放入新的离心管中，把移液器刻度调至90ul，然后在离心管中吸吐3次液体（避免气泡出现），混匀之后取90ul滴入检测卡内（本步骤应该在30s内完成），滴入完成之后，立即将检测卡放入恒温孵育器内孵育8分钟后进行检测。