微生物致病菌检测仪-溶藻性弧菌检测试剂盒操作说明书
溶藻性弧菌快速检测试剂盒是基于公司科研团队诸多创新性成果,针对快速检测需求,实现在恒定温度条件下的快速检测,通过配套机器微生物致病菌检测仪快速判读结果。
【深圳芬析仪器 】→联系人:夏经理 TEL:133-1292-2783 下单有优惠哦!
【预期用途】
溶藻性弧菌检测试剂盒可用于溶藻性弧菌快速检测和筛查。
【产品特点】
1. 反应速度快,仅需 60 min。
2. 操作简单,快速判读。
3. 灵敏度高,本试剂盒检测限为10CFU/mL。
4. 特异性高,特有的多重体系降低假阳性的出现。
【试剂组成】
序号 名称 规格 数量/支
1 试剂预混液(深色遮光管) 750μL 1
2 生物酶(黄盖管) 100μL 1
3 封闭剂(透明盖管) 300μL 1
4 阳性对照(红盖管) 100 μL 1
5 快速释放剂(10毫升保存管) 3ml 1
【实验需要的器材】
微生物致病菌检测仪、0.45μm滤膜、擦拭拭子、涡旋振荡器、离心机、2-20μL移液器、20-200μl 移液器、1.5ml离心管、96孔板、200ul 反应管。
【实验前准备】
1、将微生物致病菌检测仪通电并开机;将涡旋振荡器、离心机通电等待使用;
2、将微生物快速释放剂、试剂预混液、生物酶、封闭剂、阳性对照从冰箱取出恢复至室温。试剂预混液自然解冻后涡旋混匀,瞬时离心待用。
3、取出1.5ml离心管若干只,200ul离心管、96孔板冰盒,0.45μm滤膜若干。
【样品前处理】
实验器具必须洁净并使用一次性吸头(每次取试剂前及时更换新的吸头),以避免污染干扰实验结果!!!
1、采样
水样本每次采样量为250ml;固体样本使用拭子在样本表面及可疑感染处进行擦拭,擦拭前拭子可用纯水进行蘸湿处理。
2、水样本过滤
将上述样本用孔径为0.45μm的滤膜进行过滤,将水样中的微生物截留在滤膜上。
3、微生物释放
取下滤膜,将滤膜加入到1.5ml离心管中,离心管中加入150-200μL快速释放剂,涡旋震荡混匀,100℃条件下热浴5分钟;固体样本擦拭完成后将拭子头投入1.5ml离心管中,离心管中加入150-200μl快速释放剂,涡旋震荡混匀,100℃条件下热浴5分钟;热浴完成后离心管内液体即为待检测样本。注:煮沸5分钟时,离心管应封闭完整,防止崩开。
【实验步骤】
1、取 n 个反应管(n=样本数+阳性对照1+阴性对照1),单个反应体系配制如下:
试剂 体系配制
试剂预混液(深色遮光管) 44×(n+1)μL
生物酶 (黄盖管) 2.5×(n+1)μL
2、用移液器在一个新的 1.5 mL 离心管中加入上述试剂,涡旋混匀后瞬时离心。在每个反应管中加入46μl混匀后的试剂,加入约10μl封闭剂(透明盖管)进入反应管中。
3、在上述n个反应管中,用移液器在一个反应管中加入阴性对照(纯水即可)4μl,更换吸头后在下一反应管加入阳性对照(红盖管)4μl,再次更换吸头后在下一反应管中加入待检样本4μl,每次加样均需更换吸头。每管所得反应总体积为50μl,加样时吸头需穿过封闭剂将模板加至反应管底部。盖紧管盖,瞬时离心。(吸取及加样时注意不要产生明显气泡);
4、将准备好的反应管,放置到检测设备中,按照检测程序63℃检测60min。
5、将检测管放入仪器后,点击调零,点击检测,开始检测。反应结束后,机器自动判读,给出阳性或阴性结果,同时可点击页面上“图谱”可观察各孔光强变化曲线,对给出的结果进行验证。实验结果在阳性对照显示“阳”,阴性对照显示“阴”的情况下为有效实验。显示“阳”即该孔位样本含有该病菌,显示为“阴”即该孔位样本不含该病菌,并同时给出相应定量。若阴、阳性对照反应管结果与上述情况不符,则本次检测结果无效,应重新检测或与产品公司联系。
【注意事项及安全提示】
1. 使用本试剂盒前请仔细阅读说明书。不同批号的产品请勿混合使用,避免反复冻融,请在有效期内使用试剂盒,由于操作不当引起的误判,以及有此误判引发的其他事项,本公司概不负责。
2. 检测空间应严格分区操作,在空间条件允许情况下,试剂配置区用于配置反应所需要的所有试剂;样品前处理区用于待测样品的处理及加样;扩增观察区用于反应进行和结果判读。各区内空间独立,试验用品专用,避免交叉污染。另外,样品处理区建议配备超净工作台,所有步骤严格按照说明书的要求进行。
3.加样时应尽量避免产生气泡,反应前注意观察反应管是否盖紧,以免泄露,造成污染。实验中所使用的离心管、吸头应保证无菌、无污染。试剂盒内阳性对照应视为具有污染性物质,应避免污染其它样本和反应试剂,导致错误检测结果。
4. 检测过程中建议穿洁净工作服,带一次性手套,使用的枪头需提前灭菌。
5. 阳性对照可能会作为污染源,污染其他试剂和待检样品,导致出现假阳性结果,在加样过程中建议最后加入阳性对照。
6. 上机前注意检查反应管是否盖紧,以免泄漏污染仪器。在反应结束后切忌开盖,以防气溶胶污染。
7. 试剂盒使用完毕废弃时按照废弃物相关规定处理,由使用者自行负责处理。
8. 工作台及各物品定期用 1%次氯酸钠、75%酒精或紫外灯处理。
【贮存方法及有效期】
1、本品应贮存在温度-20℃范围内
2、有效期6个月
3、生产日期见盒装标签
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