呕吐毒素各类检测标准及常用检测方法分析

呕吐毒素DON又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,是单端孢菌素烯烃中的一种。作为一种常见的真菌毒素，呕吐毒素在自然界中广泛存在于小麦等粮谷类农作物中，在世界范围内存在着较高的污染率。小麦一旦被呕吐毒素产毒霉菌株污染，在适宜生长环境(水分活度Aw>0.87)中，产毒菌株会迅速生长，产生呕吐毒素，而小麦中的呕吐毒素又会随小麦粉的生产过程带入到面粉中，严重的威胁到人体的健康和安全。

呕吐毒素属于剧毒或中等毒性的毒物，对人很动物都有很强的毒性，当人摄入了被呕吐毒素污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应出现迟钝等急性的中毒症状，严重的时侯损害造血系统从而造成死亡。

由于DON的严重影响引起了各国的普遍重视。美国食品药物管理局规定食品中呕吐毒素安全标准是1000ug/kg,而欧盟制定的呕吐毒素限量标准相对的较严格，谷粉及玉米粉中允许限量750ug/kg 。我国2013年国家风险监测计划已将小麦和面粉中呕吐毒素含量的检测列为重点。

呕吐毒素的限量标准

1、大麦、小麦、麦片、小麦粉≤1000ug/kg

2、玉米、玉米面（渣、片）≤1000ug/kg

3、大米、小米、高粱米、大麦米、黍米≤1000ug/kg

4、米粉、汤圆粉、面条、饺子皮、馄钝皮、烧麦皮、面糊、面筋、八宝粥罐头≤1000ug/kg

呕吐毒素检测方法的国标

（1）GB/T23503-2009《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法》

（2）GB/T5009.111-2003《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》第二法免疫测定法（ELISA)

呕吐毒素检测方法的 行标

LS/T6113-2015《粮油检测 粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定 快速定量法》

呕吐毒素商检推荐行业标准

SN/T《1571-2005进出口粮谷中呕吐毒素检验方法 液相色谱法》

常用呕吐毒素检测方法比较

1、胶体金定性卡法：是呕吐毒素**便的检测方法，检测不需要配套仪器，样品处理简单，五到十分钟就可以看到检测结果。可以根据G、T线，初步确定所测样本呕吐毒素含量范围，但不能给出具体数值，结果准确性不够，容易产生假阳性和假阴性，价格*低，可作为粗略判断方法。

2、酶联免疫吸附测定法：依据该方法开发出来的呕吐毒素检测试剂盒，可以定量的检测样品中呕吐毒素的含量，目前进口及国产试剂盒均有大量品牌，价格适中，有国标支持，但操作比较复杂，步骤较多，对人员的操作熟练程度及环境要求较高，适合有良好质检实验室的企业使用，可作为产品的初步质量控制。

3、免疫亲和柱为分离手段的色谱法：用高效液相色谱仪作为检测工具的分析方法。该项技术灵敏度高，测定范围广泛，采用单克隆免疫技术，可以特效性地将呕吐毒素和其他真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强，有国标支持。但检测成本高，仪器维护成本高。一般作为检测机构终端判定方法，也有大型企业作为产品质量卫生指标控制方法。

4、荧光定量检测卡法：应用竞争抑制免疫层析的原理，通过检测线荧光定量卡中的荧光强弱程度，定量分析待检样品中真菌毒素残留含量。准确、灵敏度高、结果可靠，可以和亲和柱方法相媲美，检测价格适中，有行业标准支持，既适合实验室检验使用，也能随车携带，收粮现场使用。

5、液相或气相串联质谱法：一般作为*端实验室实验检验方法，主要作为研究或者国家部门对毒素情况监测、风险评估。

理化方法最大的优点是结果准确、法定认可，但此方法需要大型的仪器设备，设备价格昂贵，操作过程复杂、时间较长，并且没有办法在现场和基础小型实验室使用，所以不太适用于大规模样本的筛查和日常的内控检测。酶联免疫吸附法的ELISA 方法和胶体金快速检测卡是企业常用的快速检测方法，此类方法用于大量样品的筛查，具有操作简便，检测快速，成本较低等优点，但是其准确性和重复性较差，容易造成假阳性或者假阴性的现象。综上所述，第4种荧光定量检测卡法结果快速准确、灵敏度高，是比较适中的方法。

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