动物ELISA试剂盒检测结果的特异性

基免

2015/06/02 18:27

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免疫酶技术和其他技术进行综合和交叉,是这个发展过程的明显特点.值得注意的是,电子计算机科学技术,分子生物学,物理学,化学,材料科学和数学等科学技术的发展都将影响免疫酶技术的发展.今后,免疫酶技术很有可能和电子计算机科学技术,生物体数量基因调控的深入提示以及动物ELISA试剂盒物理化学特殊新型材料形成新渗透和综合,使人类对生物科学的研究以及对病原体,细菌与病毒及相关产物的检测和研究达到前所未有的深度和高度.

动物ELISA试剂盒的操作原理

1,用特殊的微孔板作为测定板,用亲和素包被微孔板,然后用生物素标记探针的3端,再通过该生物素和包被在微孔板上的亲和素发生连接,将探针固定在微孔板上,形成一个固相捕获系统.注意:探针5端和待检靶序列5端的一段要互补.

2,在扩增时,引物用抗原(生物素,地的高辛或荧光素酶等)标记,这样扩增产物中就会渗入抗原.

3,PCR扩增产物与微孔板上的探针杂交,从而捕获被测靶序列,由于扩增产物中已经渗入抗原,在微孔中加入HRP标记抗体后,酶标抗体就与靶序列的抗原免疫结合,最后加入酶底物进行酶促显色,通过光密度测定实现精确定量.

动物ELISA试剂盒比PCR本身在病毒分型,基因多态性分析与克隆鉴定等方面有其独特的优势.另外,不应用同位素标记,因而避免了放射性带来的危害,而且整个实验周期仅需6h左右,较Southern blot杂交大为缩短实验时间,操作简便,可用于大量标本的检测.

尽管与荧光素染色凝胶电泳相比较,灵敏性和准确性有显著的提高,但是ELISA基本上是一个开放性的反应系统,特别是在洗涤ELISA反应板时,很容易造成污染,从而引起假阳性.因此,在动物ELISA试剂盒整个实验过程中,必须进行严格的无菌操作.同是,动物ELISA试剂盒对PCR产物和探针的杂交条件(PCR产物的稀释度,杂交温度和时间)要求严格.