低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa检测试剂盒检测时间快而受到大多数科研士的喜欢,但其反应时间应严格控制。加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
科研名称:低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒
英文学名:Human hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit
实验技巧:HIF-1α,缺氧诱导因子1α(Hypoxiainduciblefactor-1α)。HIF-1α作为缺氧应答的全局性调控因子能够广泛激活缺氧相关生理反应的众多基因,精确调节细胞代谢中的氧气浓度。HIF-1α最先由Semenza等在缺氧诱导的Hep3B细胞核抽提物中发现,该物质是一种DNA结合蛋白分子,能与红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)基因的3’端增强子序列结合,促进其转录。HIF-1主要以二异源二聚的形式存在,由120kD的α亚基(HIF-1α)和具有91,93,94kD3种分子量β亚基(HIF-1β)组成,异源四聚体少见。HIF-1α为HIF-1所特有,似乎对结合作用特异性的贡献更多一些。HIF-1α既是HIF-1的调节亚基又是活性亚基,氧气对HIF-1活性的调节主要通过该亚基。HIF-1α和HIF-1β均为bHLH转录因子超家族成员,并具有PAS(Per-AHR/ARNT-sim〕。
性状:盒装液体。
检测波长:450nm
所需样本体积:50-100ul
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
有效期:六个月
科研范畴:科研实验定量、定性分析。
保质期:6个月,本公司试剂盒系列产品均为最新批次。
低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa检测试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
应用领域:ELISA试剂盒等产品满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求,不用于临床诊断。
ELISA试剂盒安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
ELISA试剂盒经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
主要分为以下系列:1、细胞因子检测试剂盒 2、内分泌检测试剂盒 3、肝纤维化检测试剂盒 4、心肌梗塞检测试剂盒 5、肿瘤标志物检测试剂盒 6、自身免疫检测试剂盒 7、.优生优育检测试剂盒 8、传染病检测试剂盒等等。
如何获得低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa检测试剂盒完美曲线?做实验就想得到一个完美的结果,以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
下面我们就一步步来实现这个目标:
1、首先,将数据整理好输入Excel,分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。
![文章1.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/b605f932-fb7e-479f-a72a-e2eac323d16f.jpg)
2、拖动鼠标选取完成的数据区,并点击图表向导,在图表类型中选“XY散点图”,并选择子图表类型的“散点图”(第一个没有连线的),如下图所示。
![文章2.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/11de451f-2860-493c-a078-9174829a70e6.jpg)
3、点击“下一步”,出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列”。
![文章3.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/fdbbdfde-5db4-4e68-a684-c54df155476e.jpg)
在做ELISA标准曲线,并通过此曲线求样本浓度时,因样本OD值是已知的,因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到,横坐标X值为OD值,纵坐标Y为标准品浓度,这正是我们想要的。
有时需要我们手动选择X值,这时可以点击“系列”来更改,如下图。
![文章4.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/fd356712-2c52-4c68-a036-7d481ea0d987.jpg)
4、如果要对横坐标和纵坐标进行调换,我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标,结果如下图:
![文章5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/bfa8175a-c481-4065-bd5c-b2f63368aa6d.jpg)
5.调好之后,然后点击“下一步”出现图标选项界面,如下图。
![文章6.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/14fcca1c-4ae3-4842-a3e1-494b8c73355c.jpg)
6.点击“下一步”,在弹出的窗口再点击“完成”,现在一张带标准值的完整散点图就已经完成,如下图。
![文章7.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/d75546fe-c10c-413a-84c9-7acdf94c4f89.jpg)
7、到了这一步,散点图便完成了。我们可能会问,曲线在哪里啊?
其实很简单,先点击图上的标准值点(记住一定要点选上),然后单击右键,点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框,有线性,对数,多项等选项,如下图:
![文章8.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/caf85296-45e0-4af4-b049-1602b08da227.jpg)
8、在选择之前,我们先对上图做一下肉眼观察,如果那些点能连成一条直线,或接近直线,我们就选择“线性”,意思就是出来的趋势线是一条直线,相应的该直线的方程就是y=ax+b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的,也就是说不是一条完全的直线,这时我们可以选择“多项式”,多项式后面还有“阶数”的选择,也就是说求出来的方程是几次方,我们一般选“2阶”,即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后,弹出以下窗口。
![文章9.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/16aedf0f-1bd6-4f7f-969f-3a36105a689c.jpg)
9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来,以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线(一定要选中,选中后出现下图的样子即线由很多店标识出来),单击鼠标右键,选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡,出现下图,我们选择显示公式,显示R方,即相关系数,这时公式与R方值便都显示出来了。
![文章10.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/ff6aeb86-6a19-4b94-86cc-ab06dc13a2e5.jpg)
![文章11.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/90c9baa5-9dee-4e7b-b5fc-7838e08670a9.jpg)
我们将样本的OD值作为X代入上述方程,求出来的便为浓度值了。
使用这种方法绘制ELISA试剂盒曲线图,一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上,本例中为0.9999,非常不错的曲线,这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。
低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa检测试剂盒免费代测服务:
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