鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)elisa检测试剂盒检测时间快而受到大多数科研人士的喜欢,但其反应时间应严格控制。加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
科研名称: 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)ELISA试剂盒
英文学名: Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit
实验技巧:IgY,由两条重链(H)和轻链(L)组成,重链(υ)由一个可变区(V)和4个恒定区(C)组成,没有铰链结构。完整分子量为180KDa(7.8S),重链为67-70KDa,轻链为25KDa,但还存在一个小体积副本,120KDa(5.7S),发现于野鸭和某些龟类中。克隆IgYH链表明,较小的IgYH链缺乏C3、C4区,由于使用了特异的末端外显子(位于C2和C3恒定区外显子间的内含子中),5.7S的IgY的H链仅有两个C区,实际与7.8SIgY的H链CH1和CH2相一致。5.7SIgY与F(ab`)2片段十分相似,因此正确名称为IgY(△Fc),其H链为υ(△Fc)。7.8SIgY和5.7SIgY(△Fc)可共存于同一种动物或单独存在:鸭和鹅都有全长和截短的IgY,鸡和火鸡仅有全体积的IgY分子。比较IgG和IgY的恒定区发现,IgG的Cγ2、Cγ3与IgY的Cυ3、Cυ4极相似,而Cυ2可能经“压缩”形成IgG的铰链结构,铰链结构是哺乳动物抗体的独特结构。在IgY分子结构上的Cυ1-Cυ2和Cυ2-Cυ3间存在脯氨酸、甘氨酸残基,这些区域为IgY分子提供了一定的摆动性。
性状:盒装液体。
检测波长:450nm
所需样本体积:50-100ul
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
有效期:六个月
科研范畴:科研实验定量、定性分析。
保质期:6个月,本公司试剂盒系列产品均为最新批次。
鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)elisa检测试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
应用领域:ELISA试剂盒等产品满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求,不用于临床诊断。
ELISA试剂盒安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
ELISA试剂盒经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
主要分为以下系列:1、细胞因子检测试剂盒 2、内分泌检测试剂盒 3、肝纤维化检测试剂盒 4、心肌梗塞检测试剂盒 5、肿瘤标志物检测试剂盒 6、自身免疫检测试剂盒 7、.优生优育检测试剂盒 8、传染病检测试剂盒等等。
如何获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)elisa检测试剂盒完美曲线?做实验就想得到一个完美的结果,以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
下面我们就一步步来实现这个目标:
1、首先,将数据整理好输入Excel,分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。
![文章1.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/caf61f3f-a0fa-43a1-99ce-dd6306a05ccd.jpg)
2、拖动鼠标选取完成的数据区,并点击图表向导,在图表类型中选“XY散点图”,并选择子图表类型的“散点图”(第一个没有连线的),如下图所示。
![文章2.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/783bd68d-7ce4-4f6f-b178-06ad84572246.jpg)
3、点击“下一步”,出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列”。
![文章3.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/4f8fc70f-8775-47e4-8c15-249f927f6e5c.jpg)
在做ELISA标准曲线,并通过此曲线求样本浓度时,因样本OD值是已知的,因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到,横坐标X值为OD值,纵坐标Y为标准品浓度,这正是我们想要的。
有时需要我们手动选择X值,这时可以点击“系列”来更改,如下图。
![文章4.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/cca8a589-934b-40e9-9427-9b5a34ad3c95.jpg)
4、如果要对横坐标和纵坐标进行调换,我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标,结果如下图:
![文章5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/3f204d7b-9706-462d-804c-227213a57d05.jpg)
5.调好之后,然后点击“下一步”出现图标选项界面,如下图。
![文章6.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/a9bcecc2-0774-4a03-8580-c02acec5e446.jpg)
6.点击“下一步”,在弹出的窗口再点击“完成”,现在一张带标准值的完整散点图就已经完成,如下图。
![文章7.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/05635134-36cd-4efa-aa10-a91bb733d040.jpg)
7、到了这一步,散点图便完成了。我们可能会问,曲线在哪里啊?
其实很简单,先点击图上的标准值点(记住一定要点选上),然后单击右键,点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框,有线性,对数,多项等选项,如下图:
![文章8.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/c1cfa80c-9f9e-4d48-81d5-6f1c1609868d.jpg)
8、在选择之前,我们先对上图做一下肉眼观察,如果那些点能连成一条直线,或接近直线,我们就选择“线性”,意思就是出来的趋势线是一条直线,相应的该直线的方程就是y=ax+b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的,也就是说不是一条完全的直线,这时我们可以选择“多项式”,多项式后面还有“阶数”的选择,也就是说求出来的方程是几次方,我们一般选“2阶”,即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后,弹出以下窗口。
![文章9.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/88c6cba7-e1ec-4129-9469-6b3898e0040c.jpg)
9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来,以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线(一定要选中,选中后出现下图的样子即线由很多店标识出来),单击鼠标右键,选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡,出现下图,我们选择显示公式,显示R方,即相关系数,这时公式与R方值便都显示出来了。
![文章10.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/888867bc-e372-4ed9-b17c-1906ec24cfae.jpg)
![文章11.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/1878ed63-11f5-4b07-9e8e-7ab1de39b90c.jpg)
我们将样本的OD值作为X代入上述方程,求出来的便为浓度值了。
使用这种方法绘制ELISA试剂盒曲线图,一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上,本例中为0.9999,非常不错的曲线,这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。
鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)elisa检测试剂盒免费代测服务:
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