猪雌二醇受体(ER)elisa检测试剂盒检测时间快而受到大多数科研人士的喜欢,但其反应时间应严格控制。加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
科研名称: 猪雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒
英文学名: Porcine Estradiol receptor,ER ELISA Kit
实验技巧:雌二醇受体(Εstrogenreceptor,简称ER)是一个核受体,与其他核受体(甲状腺激素受体、视黄酸受体、VD3受体)一样,含有两个重要结构域:DNA结合域和激素结合域。
性状:盒装液体。
检测波长:450nm
所需样本体积:50-100ul
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
有效期:六个月
科研范畴:科研实验定量、定性分析。
保质期:6个月,本公司试剂盒系列产品均为最新批次。
猪雌二醇受体(ER)elisa检测试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
应用领域:ELISA试剂盒等产品满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求,不用于临床诊断。
ELISA试剂盒安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
ELISA试剂盒经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
主要分为以下系列:1、细胞因子检测试剂盒 2、内分泌检测试剂盒 3、肝纤维化检测试剂盒 4、心肌梗塞检测试剂盒 5、肿瘤标志物检测试剂盒 6、自身免疫检测试剂盒 7、.优生优育检测试剂盒 8、传染病检测试剂盒等等。
如何获得猪雌二醇受体(ER)elisa检测试剂盒完美曲线?做实验就想得到一个完美的结果,以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
下面我们就一步步来实现这个目标:
1、首先,将数据整理好输入Excel,分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。
![文章1.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/07e836a8-8a58-4ea1-bf69-90ae292a1c22.jpg)
2、拖动鼠标选取完成的数据区,并点击图表向导,在图表类型中选“XY散点图”,并选择子图表类型的“散点图”(第一个没有连线的),如下图所示。
![文章2.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/1ba82ad9-eb8d-40d2-8b8b-ef5536a953bb.jpg)
3、点击“下一步”,出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列”。
![文章3.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/7853de5d-2537-4bde-8c63-ac0253428a95.jpg)
在做ELISA标准曲线,并通过此曲线求样本浓度时,因样本OD值是已知的,因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到,横坐标X值为OD值,纵坐标Y为标准品浓度,这正是我们想要的。
有时需要我们手动选择X值,这时可以点击“系列”来更改,如下图。
![文章4.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/bbaffa16-df31-4f34-a0f7-da24bcb26420.jpg)
4、如果要对横坐标和纵坐标进行调换,我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标,结果如下图:
![文章5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/8806c272-9eda-4c6a-93e2-297d4acdd0a3.jpg)
5.调好之后,然后点击“下一步”出现图标选项界面,如下图。
![文章6.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/ec326cad-3598-476a-9bcf-1009a931d310.jpg)
6.点击“下一步”,在弹出的窗口再点击“完成”,现在一张带标准值的完整散点图就已经完成,如下图。
![文章7.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/857f85ac-fc6a-4c6c-b2e1-cb0177d68600.jpg)
7、到了这一步,散点图便完成了。我们可能会问,曲线在哪里啊?
其实很简单,先点击图上的标准值点(记住一定要点选上),然后单击右键,点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框,有线性,对数,多项等选项,如下图:
![文章8.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/3a4ac070-60f5-482a-aac1-f983cf7448a3.jpg)
8、在选择之前,我们先对上图做一下肉眼观察,如果那些点能连成一条直线,或接近直线,我们就选择“线性”,意思就是出来的趋势线是一条直线,相应的该直线的方程就是y=ax+b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的,也就是说不是一条完全的直线,这时我们可以选择“多项式”,多项式后面还有“阶数”的选择,也就是说求出来的方程是几次方,我们一般选“2阶”,即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后,弹出以下窗口。
![文章9.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/e4294cb8-6ded-41a2-9676-2b08a600b557.jpg)
9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来,以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线(一定要选中,选中后出现下图的样子即线由很多店标识出来),单击鼠标右键,选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡,出现下图,我们选择显示公式,显示R方,即相关系数,这时公式与R方值便都显示出来了。
![文章10.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/7b33e544-d0d2-4824-8a3c-b5fb28f2ddbc.jpg)
![文章11.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201501/uepic/b5dd7116-75b6-4113-845f-7a33d4fbe66e.jpg)
我们将样本的OD值作为X代入上述方程,求出来的便为浓度值了。
使用这种方法绘制ELISA试剂盒曲线图,一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上,本例中为0.9999,非常不错的曲线,这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。
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