兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理:
HSP-40试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HSP-40浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HSP-40和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HSP-40的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记的抗HSP-40抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 检测试剂盒操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400ng/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200ng/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100ng/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50ng/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25ng/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5ng/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0ng/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 检测试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HSP-40标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HSP-40含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400ng/ml
4、敏感度: 1.0ng/ml
相关产品如下:
XY-EL-H1801c 人皮肤T淋巴细胞相关抗原(CTAGE)ELISA试剂盒 Human CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit
XY-EL-H1802c 人皮肤桥蛋白(DPT)ELISA试剂盒 Human DPT (Dermatopontin) ELISA Kit
XY-EL-H1803c 人皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA试剂盒 Human SRF/IF (Skin Reactive Factor/Inflammatory Factor) ELISA Kit
XY-EL-H1804c 人皮肤T淋巴细胞相关抗原(CLA/CTAGE)ELISA试剂盒 Human CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit
XY-EL-H1808c 人脾脏酪氨酸激酶(SYK)ELISA试剂盒 Human SYK (Spleen Tyrosine Kinase) ELISA Kit
XY-EL-H1809c 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA试剂盒 Human SMM (Smooth Muscle Myosin) ELISA Kit
XY-EL-H1810c 人平足蛋白(PDPN)ELISA试剂盒 Human PDPN (Podoplanin) ELISA Kit
XY-EL-H1812c 人破骨细胞刺激因子1 (OSF)ELISA试剂盒 Human OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit
XY-EL-H1813c 人破骨细胞相关受体(OSCAR)ELISA试剂盒 Human OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit
XY-EL-H1814c 人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 Human IgM (Immunoglobulin M) ELISA Kit
XY-EL-H1816c 人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒 Human G6PD (Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit
XY-EL-H1817c 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 Human GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit
XY-EL-H1818c 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 Human GCK (Glucokinase) ELISA Kit
XY-EL-H1819c 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA试剂盒 Human GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit
XY-EL-H1820c 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒 Human GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit
XY-EL-H1822c 人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒 Human GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit
XY-EL-H1823c 人葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)ELISA试剂盒 Human GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit
XY-EL-H1824c 人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒 Human GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit
XY-EL-H1825c 人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA试剂盒 Human GLUT4 (Glucose Transporter 4) ELISA Kit
XY-EL-H1826c 人通用转录复合体(GTC)ELISA试剂盒 Human GTC (General Transcription Complex) ELISA Kit
XY-EL-H1827c 人通用转录因子II B(GTF2B)ELISA试剂盒 Human GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit
XY-EL-H1828c 人通用转录因子II F肽1(GTF2F1)ELISA试剂盒 Human GTF2F1 (General Transcription Factor IIF, Polypeptide 1) ELISA Kit
XY-EL-H1830c 人前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒 Human PK2 (Prokineticin 2) ELISA Kit
XY-EL-H1831c 人前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒 Human PKR1 (Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit
XY-EL-H1832c 人前动力蛋白受体2(PKR2)ELISA试剂盒 Human PKR2 (Prokineticin Receptor 2) ELISA Kit
XY-EL-H1833c 人前胶原C端肽酶(PCP)ELISA试剂盒 Human PCP (Procollagen C Peptidase)ELISA Kit
更多
更多
企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
客服电话