大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyB311Ra 大鼠阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC)
xyB785Ra 大鼠脑啡肽酶(NEP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neprilysin (NEP)
xyC665Ra 大鼠利钠肽受体1(NPR1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Natriuretic Peptide ReHZptor 1 (NPR1)
xyD045Ra 大鼠利钠肽受体2(NPR2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Natriuretic Peptide ReHZptor 2 (NPR2)
xyD046Ra 大鼠利钠肽受体3(NPR3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Natriuretic Peptide ReHZptor 3 (NPR3)
xyB603Ra 大鼠生长调节致癌基因β(GROβ)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Growth Regulated Oncogene Beta (GROb)
xyB604Ra 大鼠生长调节致癌基因γ(GROγ)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Growth Regulated Oncogene Gamma (GROg)
xyA475Ra 大鼠维生素D受体(VDR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Vitamin D ReHZptor (VDR)
xyA712Ra 大鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ATPaHZ, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3)
xyB139Ra 大鼠抗利尿激素(ADH)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒
xyG369Ra 大鼠钠/钾离子转运ATP酶α1肽(ATP1α1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ATPaHZ, Na+/K+ Transporting Alpha 1 Polypeptide (ATP1a1)
xyG371Ra 大鼠钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ATPaHZ, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1)
xyG776Ra 大鼠肝细胞核因子1β(HNF1β)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta (HNF1b)
xyQ217Ra 大鼠钠/钾离子转运ATP酶β4肽(ATP1β4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ATPaHZ, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)
xyA750Ra 大鼠补体受体2(CR2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Complement ReHZptor 2 (CR2)
xyB228Ra 大鼠整合素α2(ITGα2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Integrin Alpha 2 (ITGa2)
xyB250Ra 大鼠胞外5'-核苷酸酶(NT5E)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for 5'-NucleotidaHZ, Ecto (NT5E)
xyB274Ra 大鼠早老素2(PS2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for PreHZnilin 2 (PS2)
xyD231Ra 大鼠骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Troponin T Type 1, Slow Skeletal (TNNT1)
xyD252Ra 大鼠饥饿素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ghrelin/Obestatin Preprohormone (GHRL)
xyD978Ra 大鼠肾上腺素能受体β2(ADRβ2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Beta 2 (ADRb2)
xyD979Ra 大鼠肾上腺素能受体β3(ADRβ3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Beta 3 (ADRb3)
xyE037Ra 大鼠重肽神经丝蛋白(NEFH)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neurofilament, Heavy Polypeptide (NEFH)
xyE382Ra 大鼠钠/葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Sodium/GlucoHZ Cotransporter 2 (SGLT2)
xyG005Ra 大鼠腺苷A1受体(ADORA1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Adenosine A1 ReHZptor (ADORA1)
xyQ641Ra 大鼠棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated