大鼠组织型纤溶酶原激活因子(TPA)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠组织型纤溶酶原激活因子(TPA)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠组织型纤溶酶原激活因子(TPA)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠组织型纤溶酶原激活因子(TPA)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyL113Hu 人成纤维细胞生长因子受体样蛋白1(FGFRL1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor ReHZptor Like Protein 1 (FGFRL1)
xyB287Hu 人整合素α5(ITGα5)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Integrin Alpha 5 (ITGa5)
xyE134Hu 人防御素α6(DEFα6)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Defensin Alpha 6, Paneth HZll Specific (DEFa6)
xyH262Hu 人受体活性修饰蛋白2(RAMP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for ReHZptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2)
xyH194Hu 人B类清道夫受体1(SCARB1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Scavenger ReHZptor Class B Member 1 (SCARB1)
xyD827Hu 人ⅡA组磷脂酶A2(PLA2G2A)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)
xyD317Hu 人糖原合酶激酶3β(GSK3β)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b)
xyD164Hu 人核糖核酸酶L(RNASEL)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ribonuclease L (RNASEL) 大鼠组织型纤溶酶原激活因子(TPA)ELISA试剂盒
xyB207Hu 人C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)
xyF543Hu 人溶血磷脂酸受体3(LPAR3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid ReHZptor 3 (LPAR3)
xyB434Hu 人蛋白酶3(PR3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3)
xyG796Hu 人钴胺传递蛋白Ⅱ(TCN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transcobalamin II, Macrocytic Anemia (TCN2)
xyH663Hu 人世间甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
xyF813Hu 人Anoctamin 6蛋白(ANO6)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Anoctamin 6 (ANO6)
xyF173Hu 人17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17β3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3)
xyC232Hu 人C-Raf原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶(CRAF)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (CRAF)
xyD824Hu 人血小板反应蛋白4(THBS4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4)
xyF839Hu 人转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transient ReHZptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1)
xyC221Hu 人早幼粒细胞白血病蛋白(PML)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Promyelocytic Leukemia Protein (PML)
xyF625Hu 人腱蛋白样蛋白1(CHRDL1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Chordin Like Protein 1 (CHRDL1)
xyH536Hu 人NFKB抑制因子(NKRF)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for NFKB Repressing Factor (NKRF)
xyM464Hu 人饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)
xyE002Hu 人CREB结合蛋白(CREBBP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for CREB Binding Protein (CREBBP)
xyC489Hu 人膜铁转运蛋白(FPN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ferroportin (FPN)
xyG516Hu 人复制启动因子1(REPIN1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1)
xyH547Hu 人核因子相关κB结合蛋白(NFRkB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Nuclear Factor Related To Kappa B Binding