伊红美蓝琼脂 (EMB)是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,伊红美蓝琼脂 (EMB)因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。
首先,我们要从众多培养基成分及影响的环境因素中筛选出具有主效应的因子。这时,通常采用筛选试验。主要有全因子因析设计和Plackett-Burman设计。两种筛选试验,各有千秋,但都能以最少的试验次数筛选出主效应因子。其中全因子设计能够表现出因子的三级以上交互作用,而Plackett-Burman设计由于是两水平设计,所以交互作用只在二级交互作用。另外还有部分因子因析设计。
筛选到了主效应因子,我们就可以开始进行下一步优化试验。此时,主要有中心复合设计和Box-Behnken设计。
中心组合设计是一种国际上较为常用的响应面法,伊红美蓝琼脂 (EMB)是一种5水平的实验设计法。采用该法能够在有限的实验次数下,对影响生物过程的因子及其交互作用进行评价,而且还能对各因子进行优化,以获得影响过程的最佳条件。
Box- Behnken设计是另一种国际上较为常用的响应面法,是一种3水平的实验设计法。同样具有响应面法的优点。近年来利用该法进行生物过程优化的文献比用中心组合设计法的明显地少。
斜面培养基
葡萄糖8g,酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5,分装试管。0.IMPa灭菌20min。95%酒精(食用级)40mL。摆斜面,
液体增殖培养基
葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。
醋酸菌种的制备
扩大培养过程:安瓿管,液体试管1.液体试管2,100mL三角瓶,500mL三角瓶,1000mL三角瓶,种子罐。
安瓿管开启:酒精棉球擦抹三次,用重器撞击,打开,注入0.5mL无菌水,将菌球溶解,全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内,30℃培养72h,每2h摇动—次
菌体生长:培养基变混浊后,颜色变浅,伊红美蓝琼脂 (EMB)对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液,30℃培养48h,每2h摇动—次。
xy1734支原体肉汤培养基(不含琼脂和酚红)250g用于支原体的增菌培养
xy1735支原体琼脂培养基(含精氨酸)250g用于培养支原体的基础培养基
xy1736麦迪、麦白霉素检定培养基(普通轻质斜面培养基)250g麦迪(白)霉素效价测定
xy1737阿奇霉素检定培养基250g阿奇霉素效价测定
xy1738制霉素检定培养基250g制霉素效价测定
xy1739多粘菌素B用培养基250g多粘菌素B效价测定
xy1740抗生素检定培养基9号250g白色念株菌悬液抗生素效价测定
xy1741青霉素酶制备培养基250g用于制备青霉素酶
xy1742沙氏葡萄糖琼脂培养基250g用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
xy1743沙氏葡萄糖液体培养基250g用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
xy1744胰酪胨大豆琼脂培养基250g用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
PYJ1745胰酪胨大豆肉汤培养基(胰蛋白胨大豆肉汤培养基)250g用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
xy17461%聚山梨醇酯80-玉米粉琼脂培养基250g用于白色念球菌产芽管试验
xy1749溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基250g用于绿脓杆菌的选择性分离培养
xy1750胆盐硫乳琼脂培养基250g肠道菌选择性培养基,特别是沙门氏菌的选择性分离
xy1751三糖铁琼脂培养基250g用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(葡萄糖,乳糖,蔗糖)
xy1752乳糖胆盐发酵培养基250g用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定
xy1753PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液250g用于制备药品样品的稀释液或冲洗液
xy1754营养琼脂培养基250g用于药品中细菌总数计数
xy1755营养肉汤培养基250g用于药品中一般细菌的增菌培养
xy1756甘露醇氯化钠琼脂培养基250g用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养
xy1757念珠菌显色培养基1000ml用于白色念珠菌分离和鉴定
xy1758大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)250g用途:用于医药工业洁净室(区)沉降菌的测试(GB/T 16294—2010)