DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶Endo-free BAC/PAC DNA Kit (200)
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。Endo-free BAC/PAC DNA Kit (200)
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
Endo-free BAC/PAC DNA Kit (200)相关产品系列表:
xyA450Ra大鼠激肽释放酶4(KLK4)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK5)
CEA686Ra大鼠Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen
Endo-free BAC/PAC DNA Kit (200)
(CTXII)
xyB952Ra大鼠组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Histone Acetyltransferase 1 (HAT2)
xyC350Ra大鼠末端补体复合体C5b-9(C5b-9)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-10)
xyA306Ra大鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Cathepsin L (CTSL)
xyA149Ra大鼠Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a2)
xyA321Ra大鼠半乳糖凝集素1(GAL1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Galectin 1 (GAL2)
xyA437Ra大鼠雌激素受体β(ERβ)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb)
CEA830Ra大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH)
xyF315Ra大鼠羧肽酶A1(CPA1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Carboxypeptidase A1, Pancreatic (CPA2)
xyC292Ra大鼠氨乙酰丙酸δ脱水酶(ALAD)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD)
xyH868Ra大鼠含Patatin样磷脂酶域蛋白3(PNPLA3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Patatin Like Phospholipase Domain Containing
Protein 3 (PNPLA4)
xyB480Ra大鼠甘露糖结合蛋白(MBL)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL)
xyA262Ra大鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Transferrin Receptor 2 (TFR2)
CES085Ra大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7)
xyB373Ra大鼠防御素β1(DEFβ1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1)
xyA267Ra大鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)
xyA212Ra大鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)
xyA663Ra大鼠Toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)
xyB323Ra大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Calcineurin (CaN)
xyA213Ra大鼠髓细胞触发受体1(TREM1)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1
更多
更多
企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
客服电话