DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶Plasmid Mini Kit I(200)-S Spin Column
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。Plasmid Mini Kit I(200)-S Spin Column
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
Plasmid Mini Kit I(200)-S Spin Column相关产品系列表:
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xyE474Hu 人溶质载体家族26成员4(SLC26A4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Solute Carrier Family 26, Member 4 (SLC26A4)
xyE571Hu 人卷曲同源物1(FZD1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Frizzled Homolog 1 (FZD1)
xyE671Hu 人SHC-转化蛋白1(SHC1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for SHC-Transforming Protein 1 (SHC1)
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xyE698Hu 人鞘氨醇激酶1(SPHK1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sphingosine Kinase 1 (SPHK1)
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xyE779Hu 人膜联蛋白A9(ANXA9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Annexin A9 (ANXA9)
xyE780Hu 人膜联蛋白A10(ANXA10)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Annexin A10 (ANXA10)
xyE842Hu 人白介素1ζ(IL1ζ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Zeta (IL1z)
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xyE915Hu 人沉默调节蛋白5(SIRT5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sirtuin 5 (SIRT5)
xyE917Hu 人沉默调节蛋白7(SIRT7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sirtuin 7 (SIRT7)
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xyF205Hu 人腺苷酸激酶3(AK3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Adenylate Kinase 3 (AK3)
xyF255Hu 人钙蛋白酶6(CAPN6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Calpain 6 (CAPN6)
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xyF295Hu 人封闭蛋白5(CLDN5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Claudin 5 (CLDN5)
xyF317Hu 人羧肽酶A4(CPA4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Carboxypeptidase A4 (CPA4)
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企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
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