50×Denhardt's液

DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极移动。

制备琼脂糖凝胶50×Denhardt’s液

1 ．称 1. 2g 琼脂糖，加 100ml 电泳缓冲液（ 1×TAE ）加热熔化，取出摇匀，即为 1. 2% 的凝胶。

2. 当胶液冷至 60℃ 时，加 EB10μl ，小心混匀，缓慢倒入制胶模具中，在胶一端插上梳子。

3 ．待胶凝固后，拨出梳子，将模具置于电泳槽中，加入 1×TAE ，让液面高于胶面 2 -3mm 。

4 ．取 4ul 质粒，加 2ul lodaing buffer ， 6ulddH 2 O ，混匀，用加样器吸取样品。加入点样孔中，注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中，不可刺穿凝胶，也要防止将样品溢出孔外。

5 ．接通电源， 1-5V/cm 电压，开始电泳。50×Denhardt’s液

6 ．当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处，停止电泳。

7. 切断电源后，取出凝胶，在紫外灯（ 360nm 、 312nm 或 254nm ）下或经凝胶成像系统观察或拍照。

碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内，线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕，仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时，共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕成网状结构，通过离心，染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。

50×Denhardt’s液相关产品系列表：

xyH877Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶2(HS6ST2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 2 (HS6ST2) 

xyH876Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶3(HS6ST3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 3 (HS6ST3) 

xyK169Hu 人C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 3 

(C1QTNF3)

xyJ051Hu 人鸟嘌呤脱氨酶(GDA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Guanine Deaminase (GDA) 

xyH881Hu 人硫酸肝素-2-O-磺基转移酶1(HS2ST1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparan Sulfate-2-O-Sulfotransferase 1 (HS2ST1) 

xyK504Hu 人钙卫蛋白(CALPRO)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Calprotectin (CALPRO) 

xyA433Hu 人蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd) 

xyA330Hu 人一氧化氮合酶相互作用蛋白(NOSIP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Interacting Protein 

50×Denhardt’s液

(NOSIP)

xyA276Hu 人着丝粒蛋白E(CENPE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Centromere Protein E (CENPE) 

xyA679Hu 人AMP激活蛋白激酶α1(PRKAα1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1 (PRKAa1) 

xyA599Hu 人颗粒酶A(GZMA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Granzyme A (GZMA) 

xyB121Hu 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Macrophage Stimulating Protein (MSP) 

xyB447Hu 人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Acetylcholinesterase (AchE) 

xyL222Hu 人自噬相关蛋白7(ATG7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Autophagy Related Protein 7 (ATG7) 

xyB297Hu 人细胞绒毛蛋白(CVL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cytovillin (CVL) 

xyE405Hu 人Asc型氨基酸转运蛋白1(ASC1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Asc Type Amino Acid Transporter 1 (ASC1) 

xyB929Hu 人胆碱乙酰转移酶(ChAT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT) 

xyB685Hu 人整合素αM(ITGαM)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 

CEW958Hu 人糖抗原19-5(CA19-5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 19-5 (CA19-5)