DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶标准马血清
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。标准马血清
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
标准马血清相关产品系列表:
xyL817Hu 人无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family,
Member 4 (WNT4)
xyM113Hu 人含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for RCC1 And BTB Domain Containing Protein 2 (RCBTB2)
xyM285Hu 人类固醇5α还原酶2(SRD5α2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 2 (SRD5a2)
xyM701Hu 人含SET域蛋白7(SETD7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for SET Domain Containing Protein 7 (SETD7)
xyN696Hu 人赫曼斯基普德拉克综合征蛋白6(HPS6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hermansky Pudlak Syndrome Protein 6 (HPS6)
xyN806Hu 人丝氨酸蛋白酶50(PRSS50)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protease, Serine 50 (PRSS50)
xyN888Hu 人含Toll白介素1受体域衔接蛋白(TIRAP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Toll Interleukin 1 Receptor Domain Containing
标准马血清
Adaptor Protein (TIRAP)
xyP164Hu 人肌球蛋白重链7B(MYH7B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7B, Cardiac Muscle Beta (MYH7B)
xyP550Hu 人无翅型MMTV整合位点家族成员9B(WNT9B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site
Family, Member 9B (WNT9B)
xyP605Hu 人T-框蛋白21(TBX21)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for T-Box Protein 21 (TBX21)
xyP862Hu 人粘蛋白12(MUC12)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Mucin 12, Cell Surface Associated (MUC12)
xyQ641Hu 人棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated Protein Like