DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶兔抗牛IgG
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。兔抗牛IgG
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
兔抗牛IgG相关产品系列表:
xyH876Hu 人硫酸肝素-6-O-磺基转移酶3(HS6ST3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 3 (HS6ST3)
xyK169Hu 人C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 3
(C1QTNF3)
xyJ051Hu 人鸟嘌呤脱氨酶(GDA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Guanine Deaminase (GDA)
xyH881Hu 人硫酸肝素-2-O-磺基转移酶1(HS2ST1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparan Sulfate-2-O-Sulfotransferase 1 (HS2ST1)
xyK504Hu 人钙卫蛋白(CALPRO)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Calprotectin (CALPRO)
xyA433Hu 人蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd)
xyA330Hu 人一氧化氮合酶相互作用蛋白(NOSIP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Interacting Protein
兔抗牛IgG
(NOSIP)
xyA276Hu 人着丝粒蛋白E(CENPE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Centromere Protein E (CENPE)
xyA679Hu 人AMP激活蛋白激酶α1(PRKAα1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1 (PRKAa1)
xyA599Hu 人颗粒酶A(GZMA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Granzyme A (GZMA)
xyB121Hu 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Macrophage Stimulating Protein (MSP)
xyB447Hu 人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Acetylcholinesterase (AchE)
xyL222Hu 人自噬相关蛋白7(ATG7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Autophagy Related Protein 7 (ATG7)
xyB297Hu 人细胞绒毛蛋白(CVL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cytovillin (CVL)
xyE405Hu 人Asc型氨基酸转运蛋白1(ASC1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Asc Type Amino Acid Transporter 1 (ASC1)
xyB929Hu 人胆碱乙酰转移酶(ChAT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT)
xyB685Hu 人整合素αM(ITGαM)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM)