DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶羊抗小鼠IgG
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。羊抗小鼠IgG
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
羊抗小鼠IgG相关产品系列表:
xyP643Hu 人核糖体蛋白L23A(RPL23A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ribosomal Protein L23A (RPL23A)
xyD171Hu 人同线蛋白2(ST2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Syntenin 2 (ST2)
xyL050Hu 人钾中间小电导钙激活通道蛋白亚家族N成员2(KCNN2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Potassium Intermediate Small
Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2 (KCNN2)
xyL621Hu 人白介素1家族成员9(IL1F9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9)
xyL980Hu 人增殖关联蛋白2G4(PA2G4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Proliferation Associated Protein 2G4 (PA2G4)
xyE784Hu 人膜联蛋白A4(ANXA4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Annexin A4 (ANXA4)
xyF880Hu 人分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1)
xyB097Hu 人运动因子相关蛋白1(MRP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Motility Related Protein (MRP1)
xyC102Hu 人骨成型蛋白3(BMP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 3 (BMP3)
xyC797Hu 人非受体酪氨酸激酶2(TNK2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tyrosine Kinase, Non Receptor 2 (TNK2)
xyG685Hu 人肌钯蛋白(MYPN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Myopalladin (MYPN) 羊抗小鼠IgG
CEG291Hu 人鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2A (GUCA2A)
xyL122Hu 人GM2神经节苷脂激活因子(GM2A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for GM2 Ganglioside Activator (GM2A)
xyD089Hu 人溶酶体酸性磷酸酶2(ACP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2)
xyB280Hu 人组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD)
xyD058Hu 人中性鞘磷脂酶(NSMASE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)
xyA048Hu 人抑制素βE(INHβE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Inhibin Beta E (INHbE)
xyL418Hu 人DEAD框肽5(DDX5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for DEAD Box Polypeptide 5 (DDX5)
xyD775Hu 人蛋白二硫化物异构酶A5(PDIA5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A5 (PDIA5)
xyH571Hu 人核小体装配蛋白1样1(NAP1L1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nucleosome Assembly Protein 1 Like Protein 1 (NAP1L1)
xyG324Hu 人妊娠带蛋白(PZP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Pregnancy Zone Protein (PZP)
xyF102Hu 人精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子2(SRSF2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Serine/Arginine Rich Splicing Factor 2 (SRSF2)
xyE824Hu 人醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A1