DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶兔抗豚鼠IgG
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。兔抗豚鼠IgG
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
兔抗豚鼠IgG相关产品系列表:
xyC108Hu 人生长分化因子1(GDF1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1)
xyB692Hu 人成肌分化蛋白(MyoD)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Myogenic Differentiation (MyoD)
xyH530Hu 人尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT)
xyG491Hu 人微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Microtubule Associated Protein RP/EB Family,
兔抗豚鼠IgG
Member 1 (MAPRE1)
xyC107Hu 人骨形成蛋白15(BMP15)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15)
xyA498Hu 人补体受体4(CR4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Complement Receptor 4 (CR4)
xyC918Hu 人成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21)
xyG443Hu 人二肽基肽酶10(DPP10)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10)
xyH339Hu 人骨膜蛋白(POSTN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Periostin (POSTN)
xyC192Hu 人Axis抑制蛋白2(AXIN2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Axis Inhibition Protein 2 (AXIN2)
xyC986Hu 人端锚聚合酶1(TNKS1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tankyrase 1 (TNKS1)
xyC987Hu 人端锚聚合酶2(TNKS2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tankyrase 2 (TNKS2)
xyH586Hu 人肌纤蛋白(MYOC)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Myocilin (MYOC)
xyF368Hu 人肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver
(CPT1A)
xyB000Hu 人白细胞关联免疫球蛋白样受体2(LAIR2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like
Receptor 2 (LAIR2)
xyB134Hu 人黑色素瘤关联硫酸软骨素蛋白聚糖(MCSP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Melanoma Associated Chondroitin Sulfate