DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶兔抗人小鼠IgG
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。兔抗人小鼠IgG
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
兔抗人小鼠IgG相关产品系列表:
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xyA559Hu 人肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 2, Intestinal (FABP2)
xyA560Hu 人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF)
xyA628Hu 人一氧化氮合酶运输因子(NOSTRIN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Trafficker (NOSTRIN)
xyA563Hu 人白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)
xyA063Hu 人白介素17(IL17)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17)兔抗人小鼠IgG
xyA566Hu 人白介素1δ(FIL1δ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Delta (FIL1d)
xyA567Hu 人S100钙结合蛋白B(S100B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B)
xyA568Hu 人S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11)
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xyA573Hu 人Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Procollagen III N-Terminal Propeptide (PIIINP)
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xyA855Hu 人核因子κB受体激活因子配基(RANκL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B