NBT工作液 50mg/ml

DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极移动。

制备琼脂糖凝胶NBT工作液 50mg/ml

1 ．称 1. 2g 琼脂糖，加 100ml 电泳缓冲液（ 1×TAE ）加热熔化，取出摇匀，即为 1. 2% 的凝胶。

2. 当胶液冷至 60℃ 时，加 EB10μl ，小心混匀，缓慢倒入制胶模具中，在胶一端插上梳子。

3 ．待胶凝固后，拨出梳子，将模具置于电泳槽中，加入 1×TAE ，让液面高于胶面 2 -3mm 。

4 ．取 4ul 质粒，加 2ul lodaing buffer ， 6ulddH 2 O ，混匀，用加样器吸取样品。加入点样孔中，注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中，不可刺穿凝胶，也要防止将样品溢出孔外。

5 ．接通电源， 1-5V/cm 电压，开始电泳。NBT工作液 50mg/ml

6 ．当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处，停止电泳。

7. 切断电源后，取出凝胶，在紫外灯（ 360nm 、 312nm 或 254nm ）下或经凝胶成像系统观察或拍照。

碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内，线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕，仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时，共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕成网状结构，通过离心，染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。

NBT工作液 50mg/ml相关产品系列表：

xyA791Hu 人骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Osteonectin (ON)

xyA611Hu 人血小板反应蛋白(THBS1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1)

xyA614Hu 人血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡbⅢa)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/IIIa)

xyA615Hu 人纤溶抑制因子(TAFI)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)

xyA616Hu 人V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for V-Rel Reticuloendotheliosis Viral 

Oncogene Homolog A (RELA)

AEA527Hu 人抗氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Anti-Oxidized Low Density Lipoprotein Antibody 

NBT工作液 50mg/ml

(OLAb)

xyA618Hu 人速激肽受体2(TACR2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2)

xyA620Hu 人解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)

xyA784Hu 人淀粉酶β(Amyβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Amylase Beta (Amyb)

xyA782Hu 人碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Carbonic Anhydrase II (CA2)

xyA780Hu 人乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Lactoferrin (LTF)

xyA624Hu 人肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)

xyA181Hu 人中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)

xyA629Hu 人BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid)

xyA770Hu 人胱天蛋白酶5(CASP5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Caspase 5 (CASP5)

xyA771Hu 人趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)

xyA630Hu 人糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

xyA776Hu 人丙酮酸脱氢酶α(PDHα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)