DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶BL21(DE3) PlysS Competent cell
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。BL21(DE3) PlysS Competent cell
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
BL21(DE3) PlysS Competent cell相关产品系列表:
xy-E12745 大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒96t/48t Rat Interleukin 8,IL-8 ELISAkit
xy-E12746 大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒96t/48t Rat adiponectin,ADP ELISAkit
xy-E12747 大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒96t/48t Rat free chorionic gonadotropin,f-βCG ELISAkit
xy-E12748 大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒96t/48t rat aldosterone,ALD ELISAkit
xy-E12749 大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒96t/48t rat Noradrenaline,NA ELISAkit
xy-E12750 大鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒96t/48t rat Prostaglandin F,PG-F ELISAkit
xy-E12751 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒96t/48t rat Prostaglandin E1,PG-E1 ELISAkitBL21(DE3) PlysS Competent cell
xy-E12752 大鼠皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒96t/48t rat Corticosterone,CORT ELISAkit
xy-E12753 大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒96t/48t rat Endothelin 1,ET-1 ELISAkit
xy-E12754 大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒96t/48t Rat bradykinin,BK ELISAkit
xy-E12755 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒96t/48t rat Resistin ELISAkit
xy-E12756 大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒96t/48t rat prolactin,PRL ELISAkit
xy-E12757 大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒96t/48t rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISAkit
xy-E12758 大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒96t/48t rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISAkit
xy-E12759 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒96t/48t rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISAkit
xy-E12760 大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒96t/48t rat Estradiol receptor,ER ELISAkit
xy-E12761 大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒96t/48t Rat Big Endothelin,Big ET ELISAkit
xy-E12762 大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒96t/48t Rat Big Endothelin,Big ET ELISAkit
xy-E12763 大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒96t/48t Rat very late appearing antigen,VLA ELISAkit
xy-E12764 大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒96t/48t Rat Calcitonin,CT ELISAkit
xy-E12765 大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒96t/48t Rat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISAkit
xy-E12766 大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒96t/48t Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB
更多
更多
企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
客服电话