大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)含量。
实验原理
大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)水平。用纯化的大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1),再与HRP标记的大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)ELISA试剂盒温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyA140Ga 鸡尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase (uPA)
xyA060Ga 鸡白介素13(IL13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 13 (IL13)
xyA061Ga 鸡白介素15(IL15)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15)
xyA153Ga 鸡甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)
xyA166Ga 鸡胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Pepsinogen C (PGC)
xyA227Ga 鸡亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB)
xyA078Ga 鸡白介素5(IL5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5)
xyA259Ga 鸡膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5)
xyA263Ga 鸡线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A)
xyA228Ga 鸡抗缪勒管激素(AMH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Anti-Mullerian Hormone (AMH)
xyA267Ga 鸡组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)
xyA093Ga 鸡巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b)
xyA277Ga 鸡间隙连接蛋白43(CX43)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)
xyA278Ga 鸡踝蛋白(TLN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Talin (TLN)
xyA099Ga 鸡基质金属蛋白酶13(MMP13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
xyA281Ga 鸡B-细胞激活因子受体(BAFFR)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for B-Cell Activation Factor Receptor (BAFFR)
xyA284Ga 鸡肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII)
xyA282Ga 鸡组蛋白H2A(H2A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Histone H2A (H2A)
xyA292Ga 鸡α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-Fodrin (SPTAN1)
xyA008Ga 鸡血管生成素1(ANGPT1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiopoietin 1 (ANGPT1)
xyA011Ga 鸡脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)
xyA010Ga 鸡结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF)
xyA013Ga 鸡骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)
xyA014Ga 鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
xyA021Ga 鸡睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)
xyA017Ga 鸡上皮性钙黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cadherin, Epithelial (CDHE)
xyA032Ga 鸡酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)
xyA009Ga 鸡血管生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)
xyA034Ga 鸡成纤维细胞生长因子4(FGF4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)
xyA036Ga 鸡成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)
xyA605Ga 鸡脂联素(ADP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Adiponectin (ADP)
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xyA380Ga 鸡血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)
xyB827Ga 鸡轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Netrin 1 (Ntn1)
CEA991Ga 鸡饥饿素(GHRL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ghrelin (GHRL)
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企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
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