大鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠纤维蛋白肽B(FPB)含量。
实验原理
大鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠纤维蛋白肽B(FPB)水平。用纯化的大鼠纤维蛋白肽B(FPB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠纤维蛋白肽B(FPB),再与HRP标记的大鼠纤维蛋白肽B(FPB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠纤维蛋白肽B(FPB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠纤维蛋白肽B(FPB)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15大鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyA207Mu 小鼠谷丙转氨酶(ALT)ELISA试剂盒96t/48t
xyA394Rb 兔组织因子通道抑制因子(TFPI)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)
xyA837Rb 兔诱导型一氧化氮合酶(NOS2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)
xyA899Rb 兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Osteopontin (OPN)
xyA143Rb 兔血管内皮生长因子A(VEGFA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)
CEA833Rb 兔血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)
xyB859Rb 兔凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density
Lipoprotein Receptor 1 (LOX1)
xyA101Rb 兔基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)
xyA172Rb 兔血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Platelet Factor 4 (PF4)
xyA009Rb 兔血管生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)
xyA100Rb 兔基质金属蛋白酶2(MMP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)
xyA097Rb 兔基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)
xyA821Rb 兔C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)
xyA140Rb 兔尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase (uPA)
xyA868Rb 兔内皮型一氧化氮合酶(NOS3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3)
xyA218Rb 兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2)
CEA603Rb 兔载脂蛋白B100(APOB100)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Apolipoprotein B100 (APOB100)
CEA704Rb 兔载脂蛋白E(APOE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Apolipoprotein E (APOE)
CEA519Rb 兔载脂蛋白A1(APOA1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1)
xyA506Rb 兔D-二聚体(D2D)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for D-Dimer (D2D)
xyA142Rb 兔细胞间粘附分子5(ICAM5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 5 (ICAM5)
xyA846Rb 兔催乳素(PRL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Prolactin (PRL)
xyA885Rb 兔血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA)
xyA605Rb 兔脂联素(ADP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Adiponectin (ADP)
xyA133Rb 兔肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
xyA124Rb 兔转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
xyA215Rb 兔Ⅰ型胶原α2(COL1α2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2)
xyA814Rb 兔脂质转运蛋白(CETP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP)
xyA160Rb 兔α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
xyA569Rb 兔P选择素(SELP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)
xyA568Rb 兔S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11)
xyA567Rb 兔S100钙结合蛋白B(S100B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B)
xyA056Rb 兔白介素10(IL10)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)
xyA563Rb 兔白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b)