大鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠血清淀粉样P物质(SAP)含量。
实验原理
大鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血清淀粉样P物质(SAP)水平。用纯化的大鼠血清淀粉样P物质(SAP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠血清淀粉样P物质(SAP),再与HRP标记的大鼠血清淀粉样P物质(SAP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠血清淀粉样P物质(SAP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠血清淀粉样P物质(SAP)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,大鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyB952Ra 大鼠组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Histone Acetyltransferase 1 (HAT2)
xyC350Ra 大鼠末端补体复合体C5b-9(C5b-9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-10)
xyA306Ra 大鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cathepsin L (CTSL)
xyA149Ra 大鼠Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a2)
xyA321Ra 大鼠半乳糖凝集素1(GAL1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Galectin 1 (GAL2)
xyA437Ra 大鼠雌激素受体β(ERβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb)
CEA830Ra 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH)
xyF315Ra 大鼠羧肽酶A1(CPA1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Carboxypeptidase A1, Pancreatic (CPA2)
xyC292Ra 大鼠氨乙酰丙酸δ脱水酶(ALAD)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD)
xyH868Ra 大鼠含Patatin样磷脂酶域蛋白3(PNPLA3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Patatin Like Phospholipase Domain Containing
Protein 3 (PNPLA4)
xyB480Ra 大鼠甘露糖结合蛋白(MBL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL)
xyA262Ra 大鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transferrin Receptor 2 (TFR2)
CES085Ra 大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7)
xyB373Ra 大鼠防御素β1(DEFβ1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1)
xyA267Ra 大鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)
xyA212Ra 大鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)
xyA663Ra 大鼠Toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)
xyB323Ra 大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Calcineurin (CaN)
xyA213Ra 大鼠髓细胞触发受体1(TREM1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1
(TREM1)
xyB820Ra 大鼠肌钙蛋白T(TNT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Troponin T (TNT)
xyA335Ra 大鼠尾加压素2受体(UTS2R)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Urotensin 2 Receptor (UTS2R)
xyA529Ra 大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Thrombomodulin (TM)
xyB851Ra 大鼠血管内皮生长因子121(VEGF121)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 121
(VEGF121)
xyB371Ra 大鼠转醛缩酶(TALDO1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transaldolase (TALDO1)
xyB908Ra 大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Aggrecan (AGC)
xyF998Ra 大鼠神经肽Y受体Y5(NPY5R)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R)
xyC534Ra 大鼠组氨酸丰富糖蛋白(HRG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Histidine Rich Glycoprotein (HRG)
xyC058Ra 大鼠白介素20(IL20)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 20 (IL20)
xyC123Ra 大鼠Smad同源物3(Smad3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3 (Smad3)