大鼠神经软骨蛋白(NCDN)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠神经软骨蛋白(NCDN)含量。
实验原理
大鼠神经软骨蛋白(NCDN)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠神经软骨蛋白(NCDN)水平。用纯化的大鼠神经软骨蛋白(NCDN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠神经软骨蛋白(NCDN),再与HRP标记的大鼠神经软骨蛋白(NCDN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠神经软骨蛋白(NCDN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠神经软骨蛋白(NCDN)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室大鼠神经软骨蛋白(NCDN)ELISA试剂盒温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠神经软骨蛋白(NCDN)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyB222Ra 大鼠突触核蛋白α(SNCα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)
xyG377Ra 大鼠钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2
(ATP2B2)
xyA433Ra 大鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd)
CEA506Ra 大鼠D-二聚体(D2D)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for D-Dimer (D2D)
xyC133Ra 大鼠ⅩⅨ型胶原(COL19)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Collagen Type XIX (COL19)
xyA127Ra 大鼠蛋白酶激活受体4(PAR4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
xyB726Ra 大鼠CD163分子(CD163)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163)
xyA864Ra 大鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)
xyB954Ra 大鼠单氨氧化酶A(MAOA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Monoamine Oxidase A (MAOA)
xyE413Ra 大鼠钠/氢交换因子3(NHE3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sodium/Hydrogen Exchanger 3 (NHE3)
xyE396Ra 大鼠牛磺酸转运蛋白(TAUT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Taurine Transporter (TAUT)
xyH538Ra 大鼠NFKB激活蛋白(NKAP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for NFKB Activating Protein (NKAP)
xyD960Ra 大鼠雌激素受体相关受体α(ERRα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Estrogen Related Receptor Alpha (ERRa)
xyE798Ra 大鼠核受体共激活因子3(NCOA3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nuclear Receptor Coactivator 3 (NCOA3)
xyE387Ra 大鼠高亲和力胆碱转运蛋白(ChT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for High Affinity Choline Transporter (ChT)
CEB216Ra 大鼠松弛肽(RLN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Relaxin (RLN)
xyB286Ra 大鼠乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)
xyB742Ra 大鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for UDP Glucose Ceramide
Glucosyltransferase (UGCG)
xyF598Ra 大鼠转移关联蛋白2(MTA2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Metastasis Associated Protein 2 (MTA2)
xyD949Ra 大鼠RAR相关孤儿素受体γ(RORγ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for RAR Related Orphan Receptor Gamma (RORg)
xyA807Ra 大鼠岩藻糖苷酶αL1(FUCα1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)
CEA242Ra 大鼠摄食抑制因子1(NES1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1)
CEA819Ra 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)
xyB388Ra 大鼠中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated
Lipocalin (NGAL)
xyA450Ra 大鼠激肽释放酶4(KLK4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK5)
CEA686Ra 大鼠Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen