大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)含量。
实验原理
大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)水平。用纯化的大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1),再与HRP标记的大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xyP549Ra 大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site
Family, Member 5A (WNT5A)
xyB492Ra 大鼠鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ornithine Carbamoyl Transferase (OCT)
xyB542Ra 大鼠甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1)
CEB266Ra 大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Glucagon (GC)
xyB686Ra 大鼠B-细胞激活因子(BAFF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF)
xyB974Ra 大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶7(ADAMTS7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase
With Thrombospondin 7 (ADAMTS7)
CEF415Ra 大鼠内皮素2(EDN2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Endothelin 2 (EDN2)
xyH515Ra 大鼠神经疾病靶标酯酶(NTE)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neuropathy Target Esterase (NTE)
xyH757Ra 大鼠Klotho蛋白(KL)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Klotho (KL)
xyC109Ra 大鼠生长分化因子3(GDF3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
xyA596Ra 大鼠铜伴侣超氧化物歧化酶(SOD4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4)
xyE045Ra 大鼠大麻素受体2(CNR2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cannabinoid Receptor 2, Macrophage (CNR2)
xyB831Ra 大鼠音猬因子(SHH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Sonic (SHH)
xyD116Ra 大鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Indian (IHH)
xyC585Ra 大鼠尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2)
xyD140Ra 大鼠尿皮质素3(UCN3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3)
xyJ292Ra 大鼠白蛋白启动子D位点结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for D Site Of Albumin Promoter Binding Protein
(DBP)
xyD963Ra 大鼠神经生长因子诱导蛋白B(NGFIB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nerve Growth Factor IB (NGFIB)
xyF589Ra 大鼠微纤丝关联蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Microfibrillar Associated Protein 4 (MFAP4)
xyC781Ra 大鼠转胶蛋白(TAGLN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transgelin (TAGLN)
xyC675Ra 大鼠神经元衍生孤儿受体1(NOR1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neuron Derived Orphan Receptor 1 (NOR1)
xyH922Ra 大鼠亨廷顿蛋白(HTT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Huntingtin (HTT)
xyD067Ra 大鼠Apelin受体(APLNR)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Apelin Receptor (APLNR)
xyG439Ra 大鼠小白蛋白(PVALB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Parvalbumin (PVALB)
xyE569Ra 大鼠酶原颗粒膜糖蛋白(GP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Glycoprotein 2, Zymogen Granule Membrane (GP2)
xyF557Ra 大鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Uncoupling Protein 1, Mitochondrial (UCP1)
xyC890Ra 大鼠5羟色胺转运蛋白(SERT)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT)
xyD686Ra 大鼠3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A