大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)含量。
实验原理
大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)水平。用纯化的大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠GATA结合蛋白4(GATA4),再与HRP标记的大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
xy-E11911 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒96t/48t Mouse neutrophil elastase,NE ELISAkit
xy-E11912 小鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISAkit
xy-E11913 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA试剂盒96t/48t Mouse α-galactoyl,Gal ELISAkit
xy-E11914 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISAkit
xy-E11915 小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISAkit
xy-E11916 小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Clara cell protein,CC16 ELISAkit
xy-E11917 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β-galactosidase,βGAL ELISAkit
xy-E11918 小鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISAkit
xy-E11919 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β mannosidase,β Manase ELISAkit
xy-E11920 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒96t/48t Mouse myeloperoxidase-antineutrophil
cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISAkit
xy-E11921 小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β-Lactamase inhibitors,BLI ELISAkit
xy-E11922 小鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒96t/48t Mouse nitric oxide,NO ELISAkit
xy-E11923 小鼠β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Beta-naphthol,β-Nph ELISAkit
xy-E11924 小鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Complement 3,C3 ELISAkit
xy-E11925 小鼠叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Azidothymidine,AZT ELISAkit
xy-E11926 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β-glucosidase ELISAkit
xy-E11927 小鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒96t/48t Mouse dopamine,DA ELISAkit
xy-E11928 小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒96t/48t Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH
ELISAkit
xy-E11929 小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISAkit
xy-E11930 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒96t/48t Mouse β-glucuronidase,βGD ELISAkit
xy-E11931 小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒96t/48t Mouse glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab
ELISAkit
xy-E11932 小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Estradiol receptor,ER ELISAkit
xy-E11933 小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒96t/48t Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISAkit
xy-E11934 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒96t/48t Mouse Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISAkit
xy-E11935 小鼠苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒96t/48t Mouse L-phenylalanine,LPA ELISAkit